固定化复合芽孢杆菌微生态制剂产品研制

来源 :大连理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zphym
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随着海水养殖产业的集约化发展模式越来越普遍,水体自污染问题也日益严重,氨氮水平已成为了制约集约化海水养殖的主要胁迫因子。水质改良微生态制剂应运而生并得到了广泛应用。微生态制剂主要有两大作用,即改善养殖水体的水质和拮抗病原菌。研究表明芽孢杆菌能降低氨氮与亚硝态氮的含量,有效改良水质。作为一种益生菌,芽孢杆菌还可以通过抑制并减少病原菌改善水体生态环境。本研究旨在开发一种适用于海水养殖的固定化复合芽孢杆菌微生态制剂,以解决海水养殖中氨氮过高的问题。对实验室筛选的芽孢杆菌与农业微生物菌种保藏中心ACCC获得的具有处理富营养化水体的芽孢杆菌在同一实验条件下进行了氨氮降解率的比较。实验结果表明接种率为2%时A4的氨氮降解率最高,将氨氮值由初浓度的25 mg/L下降到了5.73 mg/L,降解率达到73.54%。对各菌株进行了氨氧化酶和内酯酶基因PCR,初步确定了A1菌株携带了AiiA内酯酶基因,借助AHL指示菌JZA1结合ONPG定量法初步验证了Al携带的内酯酶具有一定分解病原菌群体感应信号分子AHL的潜力。初步考察了摇瓶水平下不同载体超微前后固定化A4菌株的氨氮降解效果。结果表明接种率为1%时,各载体对25 mg/L氨氮的除氮效果最好的是超微前的稻壳粉,对A4固定化后的氨氮去除率为82.92%。其次是超微前的滑石粉,对A4固定化后的氨氮去除率为81.30%。玉米芯粉在微切后对A4固定化的氨氮去除率为60.12%。在5L水体的开放环境中考察了超微前的玉米芯粉,稻壳粉和滑石粉固定化菌剂的氨氮去除效果。实验结果表明曝气条件下的氨氮降解效果更好。玉米芯粉和稻壳粉固定化A4的氨氮降解率均明显高于滑石粉载体的效果。1%添加量的玉米芯粉固定化制剂可在96 h内将海水中25 mg/L初浓度的氨氮降低到11.17 mg/L,降解率为55.31%。而稻壳粉固定化组的降解率为55.45%。选择玉米芯粉作为载体进行产品制备。采用冷冻干燥法制备了4种不同的玉米芯粉固定化复合菌剂产品,采用自然干燥制备了同等混合比例的1种复合菌剂产品。每种复合菌剂由W,A1和A4三种菌组成,混合比例为1:1:1。载体与菌液的比例为1:3。实验结果表明添加脱脂奶粉并进行离心浓缩处理的超微玉米芯粉组效果最好,在5L体系中使用量为10g时对10 mg/L初浓度氨氮的降解率最高,达到70.87%,在96h内的氨氮最低浓度为2.91 mg/L,效果显著优于百乐菌商品对照组(P<0.05)。
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