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第一部分 NOSES结肠次全切除术治疗慢传输型便秘的疗效分析背景与目的:膳食结构的变化加上精神心理和社会因素的多重影响,便秘的发病率逐年增加。在西方国家和亚洲,慢性便秘患者中慢传输型便秘（slow transmission constipation,STC）发病率为13-37%,顽固性慢传输型便秘病程长、治疗复杂、疗效差,患者生活质量严重下降,从而逐渐焦虑抑郁,甚至有产生轻生的想法。STC的治疗首选多元化序贯治疗,在尝试一系列保守治疗效果不佳时,患者将最终选择手术治疗。目前治疗STC的手术方式有多种,全结肠切除回直肠吻合术和次全结肠切除盲直肠吻合术是有效且常见的术式。传统的便秘手术需要在腹壁正中做一纵向切口,手术时不仅极大损伤腹壁完整性和功能,而且腹部美容效果差,存留明显手术疤痕,术后并发症较多,随着腹腔镜技术的发展成熟,腹腔镜辅助下的微创逐渐取代传统的便秘手术,但取标本时仍需要在腹部做一5-7cm的横切口,腹腔镜辅助联合经自然腔道取标本（natural orifice secimen extraction surgery,NOSES）避免了腹部横切口,其具有手术创伤更小、腹壁美容效果更佳、术后切口愈合更快、切口并发症更少等优势。因此,本研究探讨腹腔镜结肠次全切除术联合经自然腔道取标本（natural orifice specimen extraction surgery,NOSES）治疗慢传输型便秘的有效性与安全性。方法:回顾性收集2019年1月～2021年11月在江苏省苏北人民医院接受NOSES结肠次全切除术慢传输型便秘患者的资料,采用胃肠生活质量评分（GIQLI）、Wexner便秘评分、自发排便次数（SCBM）、排便满意度、切口美容效果满意度、焦虑自评量（SAS）和抑郁自评量表（SDS）来评估手术效果。统计分析采用SPSS 25.0统计学软件。采用均数±标准差（x±s）来表示符合正态分布的计量资料,组间比较采用独立样本t检验,以P＜0.05认为差异有统计学意义。结果:21例手术均顺利完成,平均手术时间为（284.8±34.3）min,术中出血量（45.7±9.3）ml,平均住院时间为（9.2 ± 1.1）d。术后出现并发症的有5例,无围术期死亡患者。术前GIQLI（53.0±5.1）分,术后1个月分值低于术前（43.9±5.9）分（P＜0.05）,但术后第3个月（63.1±7.3）分、6个月（87.6±9.7）分、12个月（103.7 ± 9.7）分显著高于术前（P＜0.05）;术前Wexner便秘评分（23.8±3.5）分,术后第1个月（13.1±2.5）分、第3个月（11.1±2.4）分、第6个月（8.1±2.0）分和第12个月（5.9±1.4）分,较术前亦有统计学意义（P＜0.05）;患者术后早期SCBM均出现次数增多,术后1个月（7.7 ± 1.6/d）、3个月（6.1±1.1/d）,随着时间的延长,患者排便次数逐渐减少趋于稳定,6个月（4.8±1.1/d）、12个月（4.1 ± 0.9/d）。随着患者排便次数趋于正常,患者的焦虑及抑郁逐渐改善,SAS评分由术前（59.3±8.2）分,降至术后 1 个月（56.2 ± 7.5）分、3 个月（54.3±7.7）、6个月（50.8±7.2）、12 个月（42.2 ± 6.8）;SDS 评分由术前（58.6±6.6）分,降至术后1个月（55.8±7.0）分、3个月（54.3±6.9）、6个月（46.4±5.8）、12个月（40.7 ± 5.9）,SAS和SDS术后6个月及12个月较术前均有统计学差异（P＜0.05）。结论:（1）NOSES结肠次全切除术不仅能明显改善患者便秘症状和生活质量,而且能进一步缓解患者的焦虑和抑郁状态。（2）NOSES结肠次全切除术治疗便秘是安全可行的,且腹壁功能影响最小、美容效果好、患者术后心理生理负担小,值得在临床工作中开展。第二部分 慢传输型便秘术后结肠组织蛋白质组学研究背景与目的:慢传输型便秘是种常见的影响人生活质量的胃肠道疾病,尽管发病率高,但对其病理生理和病因学知之甚少,可能是多因素发病机制。目前STC的病因机制的研究包括以下几个方面:肠道神经的退化或减少;胃肠卡哈尔间质细胞（起搏细胞）减少;肠道平滑肌形态或功能异常;兴奋性神经递质的减少、抑制性神经递质的增加;肠道菌群紊乱;激素异常;社会心理因素;自身免疫等其他因素。蛋白质是几乎所有生物过程中的基本分子。蛋白质功能的异常调节是疾病病理学中最突出的因素之一;因此,了解蛋白质如何受到疾病的干扰是生物医学研究的一个重要目标。蛋白质组学实验方面的快速发展有助于发现分子水平的蛋白质调节机制与表型行为之间的关系,如疾病的发生和进展。目前,定量蛋白质组学分析已成为筛选疾病发病机制关键蛋白的重要途径。蛋白质组学分析在许多疾病的生物标志物检测方面具有很高的前景。最常用的是蛋白电泳和质谱法分析的结合。本研究的目的是通过蛋白质组学分析筛选正常结肠组织与慢传输型便秘患者结肠组织中的差异蛋白,借助生物信息学分析技术探讨STC潜在发病机制。方法:采用蛋白质组学技术中的聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）及质谱分析分离慢传输型便秘患者和正常人结肠组织标本中的蛋白,计算两组样本间的差异显著性,筛选出有显著差异的蛋白,运用生物信息学技术分析差异蛋白,包括GO功能注释、GO功能及KEGG通路富集分析、PPI蛋白网络互作及模块分析,来探讨STC患者结肠差异蛋白的功能和通路机制,最后对筛选出的显著上调的差异蛋白进行免疫组化验证。结果:在正常对照组和慢传输型便秘患者组中筛选出有差异的蛋白共90个,其中上调的蛋白有75个,下调的蛋白有15个,显著上调的蛋白有7个（C1QB,DNM2,RAB5C,ADPRS,PSMB8,RAD50,SRI）（P＜0.01）。GO功能注释表明,得到分类注释的上下调蛋白涉及生物学过程（biological processes,BP）、细胞组分（cellular components,CC）及分子功能（molecular functions,MF）3 大类共51个小类。GO富集分析表明,对于生物过程（BP）,上调的差异蛋白在生物学调节、信号传导过程显著丰富,下调的差异蛋白在生物合成过程、损伤后修复过程显著丰富;分子功能（MF）分析表明,上调的差异蛋白富含蛋白质结合和桥接,下调的差异蛋白富含Rab GTP酶结合;细胞成分（CC）分析表明,上调的差异蛋白富集在核浆及原核,下调的差异蛋白富集在核浆。KEGG途径富集分析表明,差异蛋白在抗利尿激素调控的水重吸收途径富集。PPI筛选出10个关键蛋白包括:UBC、ARRB1、FNBP1L、EPN2、RAB5B、DNM2、DHX9、HNRNPD、RAB5C、NCBP2,功能和通路富集分析显示,模块中的差异蛋白主要与内吞和剪接体相关。免疫组化结果验证了显著上调的差异蛋白（C1QB,DNM2,RAB5C,ADPRS,PSMB8,RAD50,SRI）在慢传输型便秘患者结肠组织中阳性表达（P＜0.01）。结论:（1）通过蛋白质组学技术筛选出（C1QB,DNM2,RAB5C,ADPRS,PSMB8,RAD50,SRI）显著上调的蛋白,免疫组化结果证实其在STC患者结肠中高表达。（2）KEGG途径富集分析表明,差异蛋白在抗利尿激素调控的水重吸收途径富集,上调的RAB5C和下调的NSF差异蛋白可能通过影响含有AQP2囊泡的运输从而影响结肠水代谢功能引起便秘