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背景：低氧诱导因子-1（hypoxia-inducible factor1，HIF-1）是一种由HIF-1α和 HIF-1β两个亚基组成的二聚体，HIF-1可以应激急性反应并激活多种基因参与肿瘤细胞的生长、代谢和增殖。HIF-1的活化主要取决于HIF-1α的表达，后者主要受其降解速度的调控，泛素-蛋白酶体途径是HIF-1α的主要降解途径。泛素化过程是指泛素小分子在3种酶的作用下识别并结合靶蛋白，形成靶蛋白的多聚泛素化链，该多聚体进入蛋白酶体，实现对底物蛋白的降解，泛素-蛋白酶体降解过程受去泛素化酶的可逆性调控。去泛素化是将经泛素分子修饰的靶蛋白在去泛素化酶（Deubiquitinating enzymes，DUBs）的作用下解离泛素分子使其得以循环再利用。泛素化过程与去泛素化过程共同控制着细胞内多种调节蛋白的降解与稳定，涉及细胞的生长、凋亡、侵袭和转移等诸多过程。泛素羧基末端水解酶-L3（UCH-L3）是一种去泛素化酶，参与底物蛋白如HIF-1α的去泛素化过程，从而对癌细胞的生长、增殖、侵袭与转移发挥一定的调节作用。 目的：探究在人乳癌细胞系中，UCH-L3基因对 HIF-1α表达的调控机制及在体外对人乳癌细胞系MDA-MB231生物学行为的影响。 方法：构建人乳腺癌细胞系MDA-MB231细胞 UCH-L3过表达稳定株；采用蛋白印迹（Western blot）技术检测人乳腺癌细胞系MDA-MB231细胞对照组以及UCH-L3过表达组HIF-1α与UCH-L3的蛋白表达水平情况；应用CCK-8实验检测慢病毒转染对MDA-MB231细胞增殖能力的影响；采用免疫共沉淀实验（Co-ip）探究UCH-L3对HIF-1α蛋白的调控机制。 结果：与对照组比较，UCH-L3过表达组的UCH-L3蛋白水平明显升高，差异具有统计学意义(P＜0.05)，同时HIF-1α蛋白水平的表达显著下降，细胞增殖能力减弱，差异具有统计学意义(P＜0.05)；蛋白酶体抑制剂（MG132）能够抑制蛋白酶体降解途径，从而使HIF-1α蛋白表达增加。本实验对UCH-L3过表达组细胞施加MG132，结果显示MG132使过表达组细胞的HIF-1α蛋白表达水平没有增加，反而呈现下降现象；免疫共沉淀实验也显示 UCH-L3过表达组细胞的多聚泛素化的HIF-1α蛋白显著减少，差异具有统计学意义(P＜0.05)。 结论：UCH-L3抑制MDA-MB231细胞的HIF-1α表达，抑制MDA-MB231细胞的增殖能力；UCH-L3影响MDA-MB231细胞生物学行为可能依赖依赖于HIF-1α；UCH-L3抑制MDA-MB231细胞的HIF-1α表达可能通过影响其降解过程发挥作用。