兔角膜基质细胞的生物学特性研究

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第一部分 兔角膜、结膜成纤维细胞培养的实验研究 目的 建立眼角膜、结膜细胞体外培养的方法。方法 采用组织块培养法培养兔眼角膜基质细胞及结膜成纤维细胞。结果 [1]结膜成纤维细胞在培养10天以后可以形成单层细胞。[2]眼角膜成纤维细胞在培养瓶中培养2周以后可形成单层;24孔板培养3天后细胞贴壁生长旺盛,10天形成单层。结论 眼角膜、结膜成纤维细胞均可通过组织块培养法获得成功,但在24孔培养板上眼角膜成纤维细胞比在培养瓶中贴壁快而且容易生长。 第二部分 体外培养兔角膜基质细胞对四种病毒敏感性的实验研究 目的 研究体外培养兔角膜基质细胞对病毒的敏感性。方法 采用微量细胞病变法,观察体外培养的兔角膜基质细胞对Ⅰ型和Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSVⅠ和HSV-Ⅱ)、腺病毒3型(Ad3)、滤疱性口腔炎病毒(VSV)等4种病毒的敏感性。结果 病毒接种于兔角膜基质细胞48h,HSV-Ⅰ和HSV-Ⅱ效价(TCID50)分别为64×10-3、128×10-3,滤疱性口腔炎病毒(VSV)效价(TCID50)为10-2,腺病毒3型(Ad3)不引起细胞病变。结论 兔角膜基质细胞对HSV-1、HSV-2均敏感,对VSV、Ad3不敏感。 第三部分 α2b干扰素对兔角膜基质细胞抗单纯疱疹Ⅰ型病毒实验研究 目的 研究α2b干扰素对兔角膜基质细胞抗单纯疱疹病毒的作用。方法 采用微量细胞病变法,观察α2b干扰素在体外培养的兔角膜基质细胞上的抗Ⅰ型单纯疱疹病毒的作用。结果 24小时5u、50u、500u IFN α2b分别可以抗8、32、64 TCID50的HSV-Ⅰ型病毒感染。48小时5u、50u、500u IFN α2b分别可以抗16、64、528 TCID50的HSV-Ⅰ型病毒感染。结论 α2b干扰素对体外培养兔角膜基质细胞具有明显抗Ⅰ型单纯疱疹病毒的作用。
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