Icariin调节骨髓间充质干细胞成骨成脂分化治疗激素性股骨头坏死的实验研究

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目的:SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在不同浓度激素(MPS)干预情况下,其增殖能力,成骨分化能力,成脂分化能力的变化,并深入研究其可能的成骨、成脂相关信号通路活性和关键因子的表达水平。方法:采用经典的SD大鼠BMSCs分离方法提取原代BMSCs,并对其采用流式细胞学检测鉴定。测定在不同MPS浓度干预的条件下,大鼠BMSCs增殖能力,并进一步分析不同浓度MPS对BMSCs成骨分化和成脂分化的影响。结果:随着MPS浓度的增加,BMSCs生长明显受到抑制,且caspase-3的mRNA表达水平升高,bcl-2的mRNA表达降低。一方面,MPS抑制BMSCs的ALP活性,减少其矿化结节的形成,降低其成骨分化相关因子Runx2,OC,ALP,BMP2的表达水平;另一方面,MPS增加BMSCs的TG含量,增多其脂滴形成,并且上调其成脂分化相关因子PPARγ的表达水平。结论:MPS影响骨髓间充质干细胞的数量和功能,使得成骨成脂分化异常,平衡紊乱,这是激素性股骨头坏死发病过程中的关键环节。目的:探讨Icariin能否使得BMSCs在不同浓度激素(MPS)干预情况下缓解其增殖能力和成骨分化能力以达到部分恢复成骨与成脂的动态平衡的作用。方法:测定不同浓度的Icariin对BMSCs增殖的作用。检测Icariin对MPS干预下BMSCs成骨分化和成脂分化的作用,并从分子机制上测定Icariin的这种作用的相关通路产物的表达情况。结果:与对照组相比,Icariin能增加BMSCs的增殖活性,并且能部分拮抗MPS对BMSCs增殖活性的抑制作用,使其Caspase-3的mRNA水平下调。与MPS组相比,Icariin不仅能拮抗MPS抑制BMSCs的成骨分化过程,使BMSCs的ALP活性增强,矿化结节的形成增多,成骨分化相关因子Runx2,OC,ALP,BMP2的表达水平上调;也抑制MPS增强BMSCs的成脂分化过程,使得BMSCs的TG含量降低,脂滴形成减少,下调成脂分化相关因子PPARy的表达水平。结论:Icariin能增加BMSCs的增殖活性,部分恢复BMSCs的功能,使得成骨成脂分化的平衡部分得到纠正。目的:进一步研究Icariin在体内预防和治疗股骨头坏死的作用,以评价Icariin在体内对于激素性股骨头坏死的作用效果,以期为激素性股骨头坏死的早期保头治疗寻求新的预防和治疗措施。方法:SD雌性大鼠30只,随机分为三组:空白组(Control Group),造模组(MPS Group)和治疗组(ICA+MPS Group),每组10只。在造模12周后行血清生化学,组织病理学检测和MicroCT影像学检查。结果:12周时,空白组,造模组和治疗组股骨头坏死的发生率分别为0(0/10),80%(8/10),30%(3/10)。组织学显示,与造模组相比,治疗组中骨陷窝减少,骨小梁情况和骨髓坏死情况较造模组明显改善,着色的脂滴数量较少,但仍较空白组稍差。治疗组血清ALP含量增多,TG含量降低(p<0.05)。MicroCT显示:三组中,空白组的骨密度,相对骨体积,骨表面积和组织体积的比,骨小梁数量,骨小梁厚度和骨小梁分离度均明显高于造模组和治疗组,但是治疗组比造模组的上述指标有所增加。结论:Icariin能有效的预防和治疗早期激素性股骨头坏死,重塑骨组织,延缓疾病进展。
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