本研究以本课题组构建的植酸酶毕赤酵母基因工程菌pp-Npm-8为出发菌株，对植酸酶基因phyA基因进行PCR介导的定点突变，在不改变所编码氨基酸的情况下，选用毕赤酵母偏爱的密码子对该基因第72位、146位、159位和165位编码精氨酸的两种密码子CGA、CGC进行定点突变，将4个位点的密码子突变成精氨酸高频使用的AGA，构建了突变基因phyAm-4的克隆载体pUC18-phyAm-4和酵母表达载体pPIC9k-phyAm-4，电击转化毕赤酵母，筛选获得了植酸酶毕赤酵母基因工程菌株pp-Npm-4-2。 　　植酸酶毕赤酵母基因工程菌pp-Npm-4-2酶活性测定结果表明，在BMGY/BMMY培养基中诱导36h后酶活力可达133800u/ml，比出发菌株pp-Npm-8的63667u/ml提高了1.10倍，在麦芽汁培养基中，诱导36h后酶活力达136900u/ml，比pp-Npm-8的47600u/ml提高了1.87倍。 　　植酸酶毕赤酵母基因工程菌pp-Npm-4-2表达产物的SDS-PAGE分析表明，酶蛋白分子大小为70.15KD。Southernblotting结果表明，phyA基因整合到酵母染色体DNA中。连续传10次培养实验证实，植酸酶毕赤酵母基因工程菌的遗传稳定。