黄药子淀粉样多糖的分离纯化及结构分析

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黄药子(Rhizoma Dioscoreae bulbiferae)为薯蓣科植物黄独(Dioscoreabulbifera L.)的干燥块茎,其活性成分主要包括萜类、皂苷、黄酮和多糖等。在临床上,黄药子广泛应用于甲状腺疾病和癌症的治疗。多糖是黄药子的重要活性成分,在疾病治疗过程中起着不可或缺的作用,但有关黄药子多糖的研究较少。为了进一步了解黄药子多糖的组成和结构,本论文对黄药子淀粉样多糖的分离纯化及其结构特征进行了研究。干燥的黄药子饮片经沸水煮提、80%乙醇沉淀得到黄药子水溶性总多糖DBP。单糖组成为Man(1.4%),Rha(1.0%),GlcA(1.6%),GalA(18%),Glc(44.4%),Gal(32.9%)和Ara(0.7%)。DBP经DEAE-Cellulose离子交换柱层析分级,得到中性糖级分DBPN和酸性糖级分DBPA。DBPN主要是由Glc(56.2%)和Gal(41.5%)组成,分子量分布较宽。根据水溶性的不同,对DBPN进行分级,获得易溶于水的级分(DBPNS)和难溶于水的级分(DBPNI)。DBPNI主要由Glc(97%)构成,此外还含有少量的Gal(3%)。DBPNI在冷水中的溶解性很差,遇碘-碘化钾试剂呈现蓝色。核磁共振及甲基化分析结果显示,DBPNI是以α-1,4-Glcp为主链,并存在α-1,4,6-Glcp分支的淀粉样多糖,分支度为5%。DBPNS经冻融分级,得到冻融沉淀(DBPNS-P)和冻融上清(DBPNS-S)两部分。单糖组成分析表明:DBPNS-P主要由Glc(93%)组成,并且还含有少量的Gal(7%)。DBPNS-S的溶解性好,主要由Glc(37.5%)和Gal(57.4%)组成,并且还含有少量的Man(1%)和Rha(1.1%)。采用内切半乳糖苷酶对DBPNS-S进行酶解,再经凝胶柱层析得到未被水解的大分子葡聚糖(DBPNS-S-UD)和水解产物(DBPNS-S-D)。DBPNS-S-UD主要由Glc(95.2%)组成,还含有少量的Gal(3.2%)和Man(1.6%),分子量约为3,500Da。通过FT-IR、核磁共振和甲基化分析等方法,对DBPNS-S-UD的结构特征进行了研究。结果表明,DBPNS-S-UD是以α-1,4-Glcp为主链,并存在α-1,4,6-Glcp分支的淀粉样多糖,分支度为8.3%。
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