澳洲茄碱对人胃癌细胞株MGC-803增殖、凋亡的影响

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目的:通过体外实验观察澳洲茄碱对胃癌细胞株MGC-803增殖的影响,并探讨澳洲茄碱是否可通过调控Bax、Bcl-2、Cas-3基因的表达诱导胃癌细胞凋亡,为寻找胃癌新药提供新的视野。方法:以人胃癌MGC-803细胞株为研究对象,将澳洲茄碱按(5umol/L、10umol/L、20umol/L、40umol/L、80umol/L)浓度作用人胃癌MGC-803细胞24h、48h、72h,每浓度梯度设5个复孔,通过MTT比色法检测计算各个组的增殖抑制率,通过计算得出IC50浓度,并根据IC50设置阴性对照组、20umol/L、40umol/L、80umol/L等不同浓度作为后续所有实验浓度且均处理48h;倒置相差显微镜观察各组细胞形态变化;蛋白印迹法(Western blotting)检测各组Bax、Bcl-2及Cas-3蛋白表达的变化情况。结果:MTT结果显示:澳洲茄碱在一定浓度范围内(5umol/L、10umol/L、20umol/L、40umol/L、80umol/L)作用于人胃癌MGC-803细胞24h、48h、72h的细胞增殖抑制率分别为3.81%、7.33%、11.14%、23.43%、81.15%;7.32%、11.81%、20.14%、39.56%、91.52%;14.22%、21.94%、30.24%、61.41%、96.71%。倒置相差显微镜观察示:未经药物处理的阴性对照组,细胞生长紧密,胞质饱满;各浓度实验组澳洲茄碱作用48h后,细胞出现生长减缓、细胞间连接消失,细胞膜破裂,细胞形态不规则,80umol/L浓度组最为明显,可见典型的细胞凋亡形态改变。蛋白印迹法结果显示:通过Western blot可证实,在一定范围内,随着澳洲茄碱浓度的增加,凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3表达量增加,而凋亡抑制基因蛋白Bcl-2表达量减少,均以浓度为80umol/L的药物作用明显。结论:(1)一定浓度的澳洲茄碱可以有效抑制人胃癌MGC-803细胞体外增殖,其作用呈剂量和时间依赖性;(2)澳洲茄碱可通过调控Bax、Bcl-2及Caspase-3的表达促进胃癌细胞凋亡。
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