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世界范围内腹泻是婴幼儿发病和死亡的主要疾病之一,发病率仅次于呼吸系统疾病。全世界每年都有上百万的儿童死于与腹泻相关的疾病或是并发症,并由此给全球带来巨大的疾病负担。病毒是引起婴幼儿急性腹泻的主要病原之一,常见的有轮状病毒(HRV)、杯状病毒(HuCV)、腺病毒(EAdV)和星状病毒(AstV)。因此,长期系统的监测非常必要,对预防和控制病毒性腹泻有重大作用。目的:了解导致儿童腹泻的主要的四种病毒流行特点和规律,掌握儿童病毒性腹泻的流行强度和病原构成,为制订病毒性腹泻防治策略提供参考依据。方法:1采用哨点医院监测方法采集59月龄以下住院腹泻病例粪便标本。2用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测轮状病毒抗原和用Real-timePCR法对杯状病毒、星状病毒和肠道腺病毒进行核酸检测。3再采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法对轮状病毒分型。4分别随机选择A组G9型轮状病毒和诺如II型病毒各10株PCR产物进行基因序列测定,分析其序列特征并绘制进化树。5用SPSS软件包统计处理实验结果。结果:在414例标本中,有235例至少有一种病毒感染,阳性率为56.8%;混合感染为18例,阳性率为4.3%。按单一病原统计,轮状病毒阳性标本190例,感染率为45.9%;杯状病毒阳性标本52例,感染率为12.6%;腺病毒和星状病毒较少,阳性标本均为6例,感染率为1.4%。混合感染分别为两种或三种病毒感染,共18例。两种病毒感染中,HRV和HuCV混合感染最多64.3%(9/14),其次是HuCV和Ast为3例;三种病毒感染仅有1例,为HRV、SV和Adv感染。190例轮状病毒阳性者中,G血清分型结果为:G3型最多,99例(52.1%);G9型37例(19.5%);G2型12例(6.3%);G1型11例(5.8%);G8型1例(0.5%);不同型混合感染18例(9.5%),其中G3+G9型6例,G1+G9型5例,G1+G3型4例,G2+G9型、G8+G9型、G2+G3+G9型各1例;未分型12例(6.3%)。P基因型分型结果为:P[8]型最多,为100例(52.6%);P[6]型19例(10%);P[4]型5份(2.6%);P[10]型1例;不同型混合感染12例(6.3%),其中P[6]+P[8]型7例(3.7%);P[8]+P[10]型2例(1.1%);P[6]+P[10]型、P[8]+P[9]型、P[4]+P[6]+P[10]型各1例;未能分型53例(27.9%)。G血清型和P基因型组合以G3P[8]型居多,为55例,占28.9%(55/190);其次为G9P[8]型26例,占13.7%(26/190);G1+G3P[8]+P[9]为1例;G1+G9P[6]+P[8]为1例;G8+G9P[6]+P[8]为1例。在杯状病毒阳性的52例中,诺如II型最多,为37例,占71.15%;其次为札如病毒,为11例;诺如Ⅰ型最少,为4例。轮状病毒以12月检出率较高,11月、12月和1月份为HRV腹泻的高峰期,主要感染18月龄以下儿童。杯状病毒、星状病毒、腺病毒未表现出明显的季节性。对10例A组G9型轮状病毒阳性标本VP7编码基因进行了序列测定,与G1、G2、G3、G4、G9参考株序列进行比对并绘制进化树。10例标本的组内核苷酸同源性为98.9%~100.0%,氨基酸同源性为99.2%~100.0%,且均与G9型参考株在同一分支上,核苷酸序列同源性亦较高,为97.6%~99.4%,与其他4个血清型G1、G2、G3、G4型的参考株同源性较低,为71.6%~79.2%,说明10例感染的HRV毒株均为G9血清型。对10例诺如II型阳性标本衣壳蛋白区核苷酸序列进行了测定,与GII1、GII2、GII3、GII4、GII5、GII7、GI1、GI2、GI4、GI6参考株序列进行比对和分析并绘制进化树。5株标本(编号为LL10070、LL10101、LL10108、10131133、LL10279)的组内核苷酸同源性为95.9%~99.7%,氨基酸同源性为96.0%~100.0%,与GII4型参考株在同一分支上,并且核苷酸序列同源性较高,为97.0%~98.2%;另外5株标本(编号为LL10100、LL10141、 LL10166、 LL10187、 LL10189)的组内核苷酸同源性为95.6%~99.1%,氨基酸同源性为96.0%~100.0%,并且与GII3型参考株在同一分支上,核苷酸序列同源性较高,为92.3%~94.4%。结论:1河北省稍点监测医院2010年度从5岁以下住院腹泻儿童检测出轮状病毒、杯状病毒、星状病毒和腺病毒,总阳性率为56.8%,轮状病毒是本地区婴幼儿病毒性腹泻的最主要病原,其次为杯状病毒。2婴幼儿腹泻发病高峰在11、12、1月份,主要感染2岁以下婴幼儿。3河北省稍点监测医院2010年度轮状病毒流行优势型别为G3血清型、P[8]基因型,G/P组合以G3P[8]为主。4河北省稍点监测医院杯状病毒以诺如II型为主,基因分析表明诺如II型存在GII-3和GII-4两个亚型。