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本课题研究了槲皮素预防癌症发生和抑制肿瘤生长的作用及其机制。在槲皮素预防癌症发生的研究方面,观察了槲皮素对苯并芘(B[a]P)引起的小鼠肺组织病变和外周血淋巴细胞DNA损伤的保护作用,并通过观察槲皮素对细胞色素P450 1A1(CYP1A1)活性的影响,探讨槲皮素预防癌症发生的作用机制。在槲皮素抑制肿瘤生长作用的研究方面,通过体外实验,观察了槲皮素对人肺腺癌A549细胞和小鼠黑色素瘤Cloudman S91细胞增殖的抑制作用,并通过观察槲皮素对Cloudman S91细胞的p53和bcl-2基因表达以及对细胞周期和细胞凋亡的调节作用,探讨槲皮素抑制Cloudman S91细胞增殖的作用机制;通过体内实验,观察了经腹腔内和经口给予槲皮素对小鼠Lewis肺癌移植瘤生长的抑制作用;制备了槐米提取物(extract from bud of Sophora japonica,英文缩写为EBSJ);观察和比较经口给予槲皮素和槐米提取物对小鼠Lewis肺癌移植瘤的治疗作用以及与顺铂联合治疗的效果;同时,通过观察经口给予槐米提取物对小鼠Lewis肺癌移植瘤细胞周期和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达的影响,探讨槲皮素和槐米提取物抑制肿瘤生长的作用机制。 在槲皮素预防癌症发生的研究部分,在体外实验中,观察了槲皮素对人肝L-02细胞株和人肝组织中CYP1A1活性的影响:采用MTT比色法测定槲皮素对人肝L-02细胞株的IC50,以此确定槲皮素的试验剂量范围,用不同剂量的槲皮素分别作用于人肝微粒体和L-02细胞后,测定人肝微粒体和L-02细胞中的EROD活性,即CYP1A1活性。结果显示:在5~20μmol/L的槲皮素浓度范围内,槲皮素对人肝L-02细胞株CYP1A1活性的抑制作用呈显著的时间和剂量效应关系;在5~15μmol/L的槲皮素浓度范围,槲皮素对人肝组织中CYP1A1活性的抑制具有剂量效应关系。在体内实验中,观察了槲皮素对B[a]P所引起的小鼠肺组织病变和血淋巴细胞DNA损伤的保护作用:槲皮素高、中、低剂量组的ICR小鼠分别以2.0、1.0、0.5g/kg·d剂量的槲皮素灌胃,正常组和模型组用槲皮素的助溶剂1%羧甲基纤维素钠灌胃,在灌胃一周后,除正常组以外的小鼠一次性腹腔注射100mg/kg剂量的B[a]P。灌胃90天后,取小鼠尾部静脉血进行单细胞凝胶电泳实验,通过荧光显像的方法观察并测量血淋巴细胞DNA损伤及拖尾长度;在光学显微镜下观察小鼠肺组织标本切片,作病理检查:测定小鼠肺脏微粒