D-山梨糖对脂肪酶热稳定性的影响及其在酶精练中的应用

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由于生物酶具有高效、专一、反应条件温和等特性,它作为一种节能减排、对环境友好的助剂,在纺织印染加工中扮演着越来越重要的角色。其中,脂肪酶的水解特性使其在棉织物精练中得到一定应用。但越来越多的棉精练工艺要求高温条件,一方面温度升高会提高酶催化速率,另一方面却因为酶的化学本质是蛋白质,在高温下半衰期较短、容易失活,极大地影响了棉织物精练的效果。因此,提高脂肪酶的热稳定性,扩大其在棉精练中的应用范围就极具重要性。本论文在不同糖类添加剂中初筛出D-山梨糖作为脂肪酶的热稳定剂,并从动力学和热力学方面讨论了D 山梨糖对脂肪酶热稳定性的影响。酶活是表征脂肪酶特性的一个重要参数。本文采用对硝基苯酚法和碱滴定法两种常用方法对脂肪酶活力进行测定,并确定pH值为8.0时对硝基苯酚法测定脂肪酶催化对硝基苯棕榈酸酯水解产物在紫外区397 nm处出现特征吸收峰。对比分析对硝基苯酚法与碱滴定法所测得的脂肪酶酶活,结果表明对硝基苯酚法的相对误差小,操作简单,且精确度高,实验结果稳定性和重复性都较好,更适合作为快速测定脂肪酶活性的方法。本文研究了脂肪酶在溶液中的热稳定性,并通过单因素实验研究了 D-山梨糖对脂肪酶热稳定性的影响。结果表明,脂肪酶的热失活基本符合一级失活动力学。同时确定当D-山梨糖浓度为0.5%(w/v)时,对提高脂肪酶稳定性最明显。而且添加D-山梨糖后,脂肪酶在75℃时半衰期从原来的8.2min提高到13min,85 ℃时半衰期从原来的3.8min提高到4.6min,95℃时半衰期从原来的3.6min提高到4.2min,可见脂肪酶在添加D-山梨糖后,其失活半衰期都得到延长,失活速率常数也相应地得到降低,说明D-山梨糖对提高脂肪酶的热稳定有一定效果。此外,本文还探讨了脂肪酶热失活的热力学参数,在添加D-山梨糖后脂肪酶失活活化能由原来的46.16 kJ/mol提高到63.57 kJ/mol,失活自由能从原来的92.76 kJ/mol提高到94.11 kJ/mol,表明D-山梨糖确实能提高脂肪酶的热稳定性。本文研究了75℃下脂肪酶在棉织物精练中的应用,对未添加和添加0.5%(w/v)-山梨糖的两组脂肪酶处理织物的精练效果进行比较,结果表明添加D-山梨糖组比未添加D-山梨糖组的精练效果好,棉织物失重率从原来的0.83%增加到2.4%,而毛效则从1.42cm增加到5.3cm,说明在脂肪酶精练过程中,添加D-山梨糖可以提高脂肪酶的热稳定性,使织物的润湿性能得到明显改善。
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