人血清白蛋白(HSA)在临床上扮演着重要角色，目前，人血清白蛋白主要在人血浆中提取制备。一方面由于血液供应有限，另一方面，由于供血人群的关系，血液来源的白蛋白有潜在的传播传染性疾病的可能。因此，利用基因工程方法生产重组人血清白蛋白，杜绝血液制品的污染源，具有极大的社会经济意义。 汉逊酵母同毕赤酵母一样都能够在以甲醇为唯一碳源、能源的培养基中生长。根据汉逊酵母遗传密码的偏爱性将HSA基因进行优化，并将人工合成的人血清白蛋白基因克隆到汉逊酵母表达载体pDGXMPT1.0上，构建了汉逊酵母HSA重组表达质粒，电转化入酵母细胞后，转化子经选择培养基(MD)中筛选出URA3~+表型转化子。采用小摇瓶培养、PCR、甲醇诱导表达、SDS-PAGE和ELISA等手段筛选相应高表达株。利用30L发酵罐进行发酵工艺开发，实现了工程细胞在发酵罐中的高密度培养，诱导61个小时rHSA表达量达到1.033g／L，此后蛋白酶的降解作用开始变得明显，诱导150个小时后rHSA的量呈较低水平。表达产物经Streamline SP离子交换层析、疏水层析和DEAE阴离子交换层析等步骤得到了纯化，最终得到电泳级纯度蛋白。将纯化得到的蛋白稀释成合适的浓度并除菌过滤，用于几组小鼠的免疫原性分析实验，免疫结束后，分离血清进行免疫双扩散和酶联免疫反应实验测定抗体，与市售人血清白蛋白相比，具有相同的免疫原性。