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本文利用整体原位杂交技术、实时荧光定量PCR技术(Real-time PCR).RACE技术、石蜡切片技术和生物信息学技术等,对日本三角涡虫和阳城多目涡虫再生过程中眼点的形态发生及相关基因的实时和原位表达情况进行了系统研究,结果如下：1.利用形态学和组织学方法,观察了日本三角涡虫(D.japonica)和阳城多目涡虫(P.yangchengensis)眼点的形态发生过程。结果表明：(1)在最适温度22℃恒温培养条件下,日本三角涡虫在切割后第4天能够看到眼点,第5天形成小的视杯,第15-16天左右眼点发育完成；在最适温度14℃恒温培养条件下,阳城多目涡虫在切割后第7天能够明显看到新生芽基,第14-15天隐约观察到眼点,第20-27天眼点数目增加较快。2.通过Real-time PCR技术,首次对三个内参基因——18sRNA、ACTB和DjEF2在涡虫头部再生过程中的表达水平和稳定性进行了研究,发现ACTB的原始Ct值变异系数最小；将所得数据分别用GeNorm和NormFinder软件分析后,提出在涡虫再生研究中,ACTB为首选内参基因。3.利用RACE技术对日本三角涡虫的Djopsin基因、阳城多目涡虫的Psix-1和Pβ-actin基因的全长cDNA进行了克隆、测序和序列分析,并根据Djopsin.Psix-1基因推导的氨基酸序列和Pβ-actin基因的核苷酸序列用邻接法构建了系统进化树；同时利用整体原位杂交技术和Real-time PCR技术研究了Psix-1基因在阳城多目涡虫成体及再生个体中的时空表达模式。研究发现：Djopsin基因的动态表达趋势与眼点形态发生的过程以及眼点避光反应的恢复趋势相对应,提出Ojopsin基因与眼点的避光反应等功能恢复密切相关；原位杂交结果表明：阳成多目涡虫成体Pstx-1基因的阳性信号主要出现在头部,眼点部位呈强阳性信号,而再生个体的杂交信号在新生芽基的基部表达最强；Real-time PCR结果显示Pstx-1的mRNA在切割后的第13、21天达到峰值。据此推测,Psix-1基因的主要功能是促进涡虫眼点前体细胞的分化,并对眼点的形成及维持起着重要作用。结合Djsix-1基因在日本三角涡虫中动态表达分析,指出Six-1i是涡虫眼点发育的关键性和标志性基因,在涡虫眼点整个发育过程中起着重要作用。4.利用Real-time PCR技术,首次对与日本三角涡虫(D.japonica)眼点再生相关的基因网络进行了全面分析。在同样实验条件下,对同一物种九个眼点再生相关基因(Djeya, Djsix-1, Eye53, DjotxA, Djnos, Djpax6, Djopsin, Djnetrin和1020HH)的动态表达情况进行了系统研究,根据它们在眼点再生不同时期的表达差异以及表达趋势将其分为早期表达组(Djeya, Djsix-1,Eye53,DjotxA和Djnos)、中期表达组(Djpax6)和晚期表达组(Djopsin, Djnetrin和1020HH)三组。提出涡虫眼点形态发生的过程也是基因网络协同作用的过程,同一基因在眼点再生的不同阶段可能执行着不同的功能,不同基因的功能可能是不同的,也可能是协同作用的。涡虫眼点再生相关基因的实时表达与眼点形态发生之间存在一定的对应关系。