鹿角盘胶原蛋白的制备及其水解产物的成分分析

来源 :长春工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hezhimou
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胶原蛋白是胶原的水解产物,具有稳定的三螺旋结构和相对较小的分子质量,降解速度较快、易于被人体吸收。近年来的相关研究证实,胶原蛋白具有多种生物学活性及药理学作用,被广泛应用于食品、化妆品、医药等领域。本文研究了鹿角盘的基本组成成分,采用胃蛋白酶提取法提取鹿角盘中的胶原蛋白并用真空冷冻干燥成鹿角盘胶原蛋白粉;另外采用生物酶解技术,将鹿角盘胶原蛋白粉酶解成肽。本课题不仅可以使大家更好的认识鹿角盘,而且能够更好的发挥其作用,使其更好的被充分利用。主要研究内容和结果如下:1.本实验采用国标对鹿角盘进行了基本成分分析。结果如下:鹿角盘灰分58.14%,脂肪2.57%,总糖1.74%,蛋白质33.27%。2.采用胃蛋白酶提取法提取鹿角盘中的胶原蛋白,并通过真空冷冻干燥得到鹿角盘胶原蛋白粉,确定胃蛋白酶最佳浓度为2%。3.采用市面常见的三种酶进行鹿角盘胶原蛋白水解对比实验,由结果可知,采用碱性蛋白酶对鹿角盘胶原蛋白水解有更高的水解率。采用响应面法优化碱性蛋白酶水解鹿角盘胶原蛋白制备鹿角盘肽的工艺条件。采用最佳水解条件对响应面法得到的结论进行验证,实验证明此方法的合理性,并且得到了鹿角盘肽的最佳制备工艺参数为:时间5.5h,pH9.5,酶量1272u/g,温度53℃,胶原蛋白水解率为22.13%。4.本实验利用膜过滤和凝胶层析对水解的胶原多肽进行纯化,并采用紫外扫描得到鹿角盘胶原多肽在220 nm处有最大吸收峰。可以说明水解液的主要成分为多肽类,经过SephadexG-25、SephadexG-15凝胶层析纯化后的鹿角盘多肽具有明显的多肽类特征,对检测波长λ=210nm,时间为13.210min得到的单体化合物进一步纯化,对鹿角盘纯化多肽进行测定,测得其分子量为1342.9m/z,又用飞行质谱仪对之进行了验证,测定结果分别为1226.7,1069.8和1010.8m/z及后续多肽片段,得知此多肽片段对应一段氨基酸片段为甘氨酸和脯氨酸(Gly, Pro),经过分析,此多肽片段符合胶原蛋白多肽的特征,可以说明本实验的产物主要为胶原蛋白多肽。
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