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非酒精性脂肪肝是高发且严重危害人类健康的饮食相关性肝损伤,从膳食角度寻找其防治因子具有重要意义。前期研究表明莱菔硫烷(SFN)可减轻酒精性肝损伤及调控脂代谢,但对非酒精性肝损伤的作用及机制尚无深入探讨。本研究探讨SFN预保护人肝细胞HHL-5后,能否抵抗油酸/软脂酸对肝细胞脂代谢的病理性损伤,重点探究内质网应激调控通路的作用,主要研究结果如下。油酸/软脂酸(1:2)作诱导剂,100-500μmol/L作用于HHL-5细胞,油红O染色检测脂滴,再检测肝细胞代谢酶和甘油三酯(TC)及胆固醇(TG),发现油酸/软脂酸300μmol/L时,多数细胞内出现红色圆珠状且非常饱满的脂滴,诱导剂剂量增大,脂滴增多。油酸/软脂酸(1:2)300μmol/L作用24h,TC和TG含量明显升高(P<0.01),谷丙转氨酶(ALT)与谷草转氨酶(AST)活性显著升高;诱导剂浓度大于400μmol/L,细胞死亡。因此,将油酸/软脂酸(1:2)300μmol/L作用24h作为诱导肝细胞HHL-5脂代谢异常的作用方式。SFN分别以时间效应和剂量效应方式预保护细胞,再用油酸/软脂酸刺激24h,发现TG和TC含量与阳性对照组比较显著降低(P<0.01),10μmol/L SFN对TG与TC含量降低最为明显,抑制AST和ALT增加,抑制后水平与阴性对照组接近。以内质网为切入点,透射电镜检测结果表明,油酸/软脂酸作用细胞24h可引起内质网扩张,提示内质网功能受损,同时影响线粒体功能,表现为线粒体颜色加深。SFN预保护后能明显改善内质网的扩张,内质网结构基本恢复到阴性对照组水平,表现为内质网成条索状,并对线粒体损伤明显改善。Real-timePCR检测内质网调控蛋白XBP1、GRP78转录水平的表达情况。发现油酸/软脂酸(1:2)300μmol/L诱导肝细胞24h后,XBP1与GRP78mRNA表达量显著增加。10μmol/L SFN使二者表达量比诱导组降低。SFN作用时间延长,XBP1与GRP78mRNA表达量减小,24h最显著。流式细胞术检测内质网调控网络中心调控因子Ca2+,发现油酸/软脂酸能诱导内质网中Ca2+流出,胞浆中Ca2+浓度升高明显高于阴性对照组。随着SFN作用浓度增加,胞浆中钙离子浓度下降。本研究结果表明,SFN能明显改善油酸/软脂酸引起的肝细胞脂代谢异常,内质网调控在其中发挥重要作用。本研究将为SFN的开发应用提供理论基础。