论文部分内容阅读
芸薹生链格孢（Alternaria brassicicola）能够引起十字花科蔬菜产生黑斑病,造成产量和质量下降,食用安全性降低,为该类蔬菜生产带来巨大的经济损失。转录因子对真菌的生长发育及致病性等都具有重要的调控作用,C6型锌指转录因子参与多种真菌的产孢及致病性等的调控,但在芸薹生链格孢中尚未报道。通过对该类转录因子基因功能的研究,有助于我们更加深入的认识芸薹生链格孢的生长发育及致病机理,对有效防治黑斑病具有重要意义。本研究主要以芸薹生链格孢（A.brassicicola）为研究对象,克隆了芸薹生链格孢一个C6型转录因子AB04837基因,根据同源重组的原理,利用Split-marker PCR重组技术以及PEG介导的原生质体转化的方法,成功获得了AB04837基因缺失突变体（ΔAB04837）,并构建了互补体C1。通过基因缺失突变体与野生菌的对比研究发现:（1）AB04837基因全长为2104 bp,cDNA全长为2055 bp,共编码684个氨基酸,含有一个保守的Zn2+结构域,有一个49 bp的内含子,与小麦长蠕孢菌（Pyrenophora tritici-repentis）亲缘关系最近。（2）AB04837基因参与调控芸薹生链格孢的菌落形态和生长,突变体菌落呈白色,气生菌丝茂盛,且生长速度显著快于野生菌。（3）AB04837基因调控芸薹生链格孢分生孢子的产生,突变体丧失了产孢能力。（4）AB04837基因参与调控芸薹生链格孢的抗氧化胁迫的能力,突变体在氧化胁迫培养基中的生长速度显著降低,对氧化胁迫敏感性增强。（5）AB04837基因参与芸薹生链格孢的渗透胁迫应答,与野生菌相比,突变体对低浓度的渗透胁迫耐受性增强,对高浓度渗透胁迫的耐受性显著降低。（6）AB04837基因参与调控芸薹生链格孢的致病性,其突变体致病力显著降低,推测AB04837基因缺失影响了芸薹生链格孢的寄主定殖能力,但对其寄主穿透能力影响较小。（7）AB04837基因参与调控芸薹生链格孢细胞壁的完整性,基因缺失突变体对SDS、CFW、CR的敏感性增强。综上所述,AB04837基因参与了芸薹生链格孢对营养生长、分生孢子的产生、渗透胁迫应答、致病力以及细胞壁生长发育等的调控。