【摘 要】
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背景来自外周血和脾脏组织的自然杀伤（Natural killer,NK）细胞是各种组织补充其免疫细胞群的来源,其异常可能与多囊卵巢综合征（polycystic ovarian syndrome,PCOS）发生相关。PCOS病人大多表现为高雄激素血症和白介素2（interleukin-2,IL-2）水平增高,它们可能是加剧PCOS症状的不利因素。但是,这些因素对NK细胞的分布和功能产生影响,以及用于
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背景来自外周血和脾脏组织的自然杀伤（Natural killer,NK）细胞是各种组织补充其免疫细胞群的来源,其异常可能与多囊卵巢综合征（polycystic ovarian syndrome,PCOS）发生相关。PCOS病人大多表现为高雄激素血症和白介素2（interleukin-2,IL-2）水平增高,它们可能是加剧PCOS症状的不利因素。但是,这些因素对NK细胞的分布和功能产生影响,以及用于治疗PCOS的最常用药物之一——二甲双胍能否对其逆转,目前尚不清楚。本研究的目的是评估NK细胞在PCOS模型小鼠外周血和脾脏组织中的分布及其CD2和CD94的表达模式,并检测二甲双胍是否可以逆转PCOS对NK细胞分布和功能所产生的影响。材料和方法雌性C57BL/6小鼠随机分为四组,每组各15只:采用脱氢表雄酮（dehydroepiandrosterone,DHEA）皮下注射联合高脂饮食（high-fat diet,HFD）建立PCOS模型小鼠（PCOS组）,以芝麻油注射联合普通喂养小鼠作为正常对照（Control组）,PCOS小鼠建模的同时,给予二甲双胍（PCOS+Metformin组）,以相应溶剂处理模型鼠作为实验对照（PCOS+Vehicle组）,检测小鼠体重、卵巢质量、空腹血糖及动情周期变化;HE染色评估卵巢形态;ELISA法检测血清T、FSH及LH水平。在确定PCOS模型小鼠的生殖和代谢特性以及二甲双胍对PCOS模型小鼠生殖和代谢方面的影响后,进一步采用流式细胞术分析外周血和脾脏组织NK、NKT、T细胞的分布,以及外周血、脾脏组织NK、NKT、T细胞CD2和CD94的百分比和平均荧光强度（mean fluorescence intensity,MFI）。通过酶联免疫吸附法分析了四组小鼠血清IL-2水平。结果与正常对照组相比,PCOS模型小鼠外周血和脾脏组织组织NK、NKT和T细胞的分布均无明显差异。给予二甲双胍后并没有对其分布产生显著影响。通过分析这些免疫细胞中CD2和CD94受体的百分比和MFI,结果显示,PCOS模型小鼠外周血NK细胞CD2受体MFI降低,脾脏组织NK细胞CD2+受体百分比降低。并且,脾脏组织NKT细胞CD94+细胞百分比升高,而外周血T细胞CD2-MFI升高。二甲双胍能显著降低PCOS模型小鼠的LH水平,但不能影响其FSH、LH/FSH比值和睾酮水平,这可能是为什么给予二甲双胍后不能对防止多囊卵巢诱导的多囊卵巢形态和动情周期紊乱提供保护的原因。二甲双胍对PCOS模型小鼠外周血和脾脏组织NK、NKT及T细胞的分布及CD2、CD94受体表达均无明显影响。尽管如此,IL-2水平在PCOS模型小鼠中显著升高,并在服用二甲双胍后显著降低。结论我们的研究表明,诱发PCOS的条件改变了外周血和脾脏组织NK细胞、NKT细胞和T细胞的功能。这些发现可以帮助我们进一步研究PCOS病理生理学中所涉及的免疫机制。
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