As<,2>O<,3>诱导HeLa细胞凋亡的分子机制研究

来源 :东南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:skiau2548
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:用As<,2>O<,3>诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡,检测As<,2>O<,3>对HeLa细胞端粒酶活性及HPV18 E6基因的影响,探讨As<,2>O<,3>诱导HeLa细胞凋亡的分子机制;了解维生素C是否能协同As<,2>O<,3>诱导HeLa细胞凋亡的作用,为临床治疗宫颈癌提供新思路.方法:采用不同浓度的As<,2>O<,3>作用于人宫颈癌HeLa细胞不同时间段后,用MTT法、光学显微镜观察、电镜、流式细胞仪等方法检测As<,2>O<,3>对HeLa细胞生长抑制作用和诱导细胞凋亡作用,用端粒酶重复片断扩增-酶联免疫法(TRAP-ELISA)测定细胞内端粒酶变化情况,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定HPV18 E6致瘤基因的表达.采用维生素C和As<,2>O<,3>联合处理HeLa细胞观察凋亡情况,测定端粒酶活性的变化.结果:2μmol·L<-1>As<,2>O<,3>处理HeLa细胞48h后,细胞生长受到抑制,出现较多凋亡细胞,并经电镜证实,随着As<,2>O<,3>浓度增加和作用时间延长,这一作用明显增强.流式细胞仪分析表明:2μmol·L<-1>As<,2>O<,3>作用48h后,G1期前面出现明显的亚二倍体峰(凋亡峰),随着剂量增加,凋亡率增加.2μmol·L<-1>As<,2>O<,3>作用48h后,端粒酶活性受抑,2μmol·L<-1>As<,2>O<,3>作用48h后,HPV18 E6表达受抑制.维生素C和As<,2>O<,3>联合处理较单一As<,2>O<,3>处理HeLa细胞后,细胞凋亡率增加,端粒酶活性抑制更明显.结论:1.2μmol·L<-1>-10μmol·L<-1>As<,2>O<,3>可抑制HeLa细胞增殖,诱导其凋亡.2.As<,2>O<,3>可抑制HeLa细胞端粒酶活性,抑制端粒酶活性为As<,2>O<,3>诱导HeLa细胞凋亡的机制之一,As<,2>O<,3>可下调HeLa细胞HPV18 E6的表达,E6表达与端粒酶活性之间存在相关性.3.维生素C通过协同As<,2>O<,3>抑制HeLa细胞端粒酶活性强化其诱导凋亡作用,小剂量维生素C联合As<,2>O<,3>可望成为临床治疗宫颈癌的一种选择.
其他文献
建筑节能是直接关系国家能源战略、环境保护和可持续发展的重要研究课题,墙体节能是建筑节能技术的重要研究内容。外墙保温节能技术主要包括外保温技术、自保温技术和内保温
该研究通过观察心肌桥-壁冠状动脉的形态学和壁冠状动脉血流动力学变化特征的研究,从以下五个部分探讨心肌桥对冠状动脉粥样硬化和血流的作用和机理;第一部分,心肌桥及壁冠状
该文利用激光诱导鼠脉络膜新生血管模型,进一步评估粉防己碱(Tetrandrine,Tet)对在体的鼠脉络膜新生血管的抑制作用以及对视网膜的毒性作用,从而为药物治疗CNV提供一种新的途