目的:肝纤维化（hepatic fibrosis）由多种慢性肝病长期发展所致,其进一步恶化发展可导致肝硬化与肝癌。然而,当前临床缺少对肝纤维化具有良好疗效的药物。据研究报道,岩黄连生物总碱对慢性肝纤维化大鼠具有抗肝纤维化作用及肝保护作用。但目前岩黄连抗肝纤维化的活性成分仍未明确。基于此,本课题以岩黄连为研究对象,采用组效关系的研究思路,结合大鼠肝星状细胞（HSC-T6）模型,对岩黄连抗肝纤维化潜在药效物质基础及其初步作用机制进行研究。方法:1.采用超高效液相色谱-四级杆飞行质谱（UPLC-Q/TOF MS）技术,根据色谱峰的准分子离子峰/分子离子峰及其相应离子碎片信息与化合物标准对照品进行比对及参考有关文献资料,对岩黄连提取物中的化学成分进行鉴定归属。2.运用高效液相色谱（HPLC）法,对岩黄连9个正交提取物样品进行了半定量分析,通过中药指纹图谱系统（traditional Chinese medicine fingerprint,TCM fingerprint）确定其共有峰;MTT法评价9个正交提取物样品对HSC-T6细胞增殖抑制的活性。3.利用SIMCA-P 11.5软件的正交投影偏最小二乘法（Orthogonal Partial least squares,OPLS）分析,研究共有峰与药效的相关性,根据S-载荷图（S-loading plot）与变异权重参数值（Variable importance in projection,VIP）辨识显著活性成分;同时结合对照品鉴定出部分共有峰。4.采用细胞乳酸脱氢酶（LDH）法观察脱氢卡维丁、巴马汀和小檗碱对人正常肝细胞（HL-7702）乳酸脱氢酶活性的影响。应用MTT法、流式细胞术（flow cytometry,FCM）、透射电镜（transmission electron microscope,TEM）分别检测HSC-T6细胞增殖、凋亡。蛋白免疫印迹（Western blot,WB）法检测与细胞凋亡密切相关蛋白caspase-3、bax、bcl-2的表达。结果:1.根据岩黄连提取物与对照品的质谱信息,并参考相关文献资料鉴定出岩黄连提取物中19个化合物,并总结了岩黄连中小檗碱、四氢小檗碱类生物碱化合物的二级质谱裂解途径。2.建立了岩黄连提取物的HPLC分析方法,对岩黄连正交9个提取物样品进行了半定量研究,结果显示不同样品同等生药量的组成成分差异很大;采用MTT法评价正交9个提取物样品抑制HSC-T6细胞的活性,结果发现由于采用不同的提取条件,使得同等生药量的正交提取物样品对HSC-T6细胞的增殖抑制活性存在差异,MTT结果显示对HSC-T6细胞最高抑制率达到90.1%,而最低的抑制率仅为5.3%。3.采用OPLS分析方法辨识出对HSC-T6细胞增殖抑制率有较大贡献的6个共有峰依次为19>18>13>20>14>16号峰。其中确证18、19和20号峰分别为脱氢卡维丁、巴马汀和小檗碱。4.LDH法测定结果显示,系列浓度梯度的脱氢卡维丁、巴马汀、和小檗碱分别与HL-7702细胞作用24h后,安全剂量范围分别为0.01⁰.15;0.01⁰.10;0.01⁰.10 mg·mL^-1。MTT结果表明脱氢卡维丁、巴马汀、和小檗碱可显著抑制HSC-T6细胞的增殖,而且发现联合给药抑制作用优于单独给药,各给药组均呈浓度依赖性（P<0.05或P<0.01）。FCM、TEM观察到经药物干预后可提高HSC-T6细胞凋亡率和引起细胞形态学发生明显变化。WB实验进一步证实了脱氢卡维丁、巴马汀、和小檗碱通过下调bcl-2,上调bax、活性caspase-3实现诱导HSC-T6细胞的凋亡。结论:1.本研究鉴定了岩黄连提取物中的19个化学成分并分析其质谱裂解途径,同时证实了岩黄连提取物可有效抑制HSC-T6细胞的增殖。2.首次采用组效关系研究岩黄连提取物对HSC-T6细胞的作用,发现了6个与抑制HSC-T6细胞增殖显著相关的潜在活性成分,其中3个确证为脱氢卡维丁、巴马汀和小檗碱;表明组效关系的研究思路为中药、特色民族药活性成分的辨识提供了借鉴。3.0.10 mg·mL^-1的脱氢卡维丁、巴马汀和小檗碱及其联合用药均具有抑制HSC-T6细胞增殖与诱导其凋亡的作用;其作用机制可能与抑制bcl-2、促进bax、caspase-3蛋白表达有关;实验结果表明脱氢卡维丁、巴马汀和小檗碱是岩黄连抗肝纤维化的潜在活性成分。4.脱氢卡维丁、巴马汀和小檗碱联合用药对HSC-T6细胞的药效活性对比单独用药效果更为明显,提示多组分协同作用有可能是岩黄连促进HSC-T6细胞凋亡的起效模式。