雌酮（E1）、雌二醇（E2）和雌三醇（E3）是最常见的人体内源性雌激素,它们对人的生理代谢有着重要影响。但是它们在人体中含量水平较低,且血清中存在较大的基质干扰,这些因素给雌激素的检测带来了一定难度。质谱技术具有灵敏度高、准确性好的优势,已经成为了检测雌激素的首选方法。然而由于雌激素的弱酸性质,电离效率低,导致质谱响应信号不高,因此需要化学衍生辅助高效液相色谱-串联质谱方法定量分析。本论文比较和探究了5种衍生化试剂,选择效果最佳的衍生化试剂3-甲基-8-喹啉磺酰氯,并建立了3-甲基-8-喹啉磺酰氯化学衍生辅助高效液相色谱-串联质谱人血清雌激素的检测方法。这是一种新的雌激素定量方法,具有衍生过程简单、检测灵敏度较高以及定量结果准确的特点。能够应用于临床检测人血清中的雌激素,可为内分泌疾病的临床质谱检测提供一种新的手段。主要研究内容如下:第一部分:雌激素衍生化方法的比较和探究已经报道过多种衍生化试剂用于雌激素检测,但是广泛的选择会给研究者们带来困惑。通过系统地比较这些衍生化试剂的优缺点,可以为特定的实验选择最佳试剂。本研究对已有报道的丹磺酰氯（DNSCl）和1,2-二甲基咪唑-5-磺酰氯（DMISCl）和以及尚未报道应用于雌激素检测的衍生化试剂3-甲基-8-喹啉磺酰氯（MQSCl）、喹啉-8-磺酰氯（QSCl）和1-甲基-1H-吡唑-4-磺酰氯（MPy SCl）进行比较和探究。计算了这5种衍生化试剂的电离效率,与实验结果具有良好的一致性。实验中对每个衍生反应的p H值、缓冲溶液丙酮/水体积比、反应温度、反应时间和衍生试剂浓度等条件分别进行了优化。最终5种衍生化试剂的衍生化效率均在98.5%以上,衍生化产物在24小时内具有良好的稳定性。通过对二级质谱图的分析,探究了各衍生产物的碎裂方式。通过对5种衍生产物的峰面积和灵敏度进行比较,结果表明3-甲基-8-喹啉磺酰氯衍生化雌激素的质谱检测信号强度和灵敏度最高。第二部分:化学衍生辅助高效液相色谱-串联质谱定量分析雌激素方法的建立该工作建立了3-甲基-8-喹啉磺酰氯衍生辅助高效液相色谱-串联质谱定量雌激素的分析方法,并进行了方法学的验证。衍生反应后,对提取溶剂以及色谱条件进行了优化,选取乙酸乙酯作为血清中雌激素的提取溶剂,随后采用同位素内标法建立了标准曲线,r~2在0.9919-0.9939内,E1、E2和E3定量限分别为2.7,4.6和5.1 pg/m L,日内精密度和日间精密度均在13.2%以内,加标回收率在92.5-114.3%之间,基质效应在91.5–122.9%之间,表明了该方法准确性好、灵敏度高。对血清样本进行反复冻融,冻融循环7天衍生产物稳定性在14.4%以内,表明了生物样本中雌激素含量和雌激素检测方法的稳定性良好。在化学衍生辅助高效液相色谱-串联质谱定量分析雌激素方法建立的基础上,检测了12例健康成年女性、7名健康女童和10名性早熟女童的血清样本。其中,12名成年女性血清中雌激素的浓度范围分别是雌酮（E1）0.059-0.199 ng/m L,雌二醇（E2）0.013-0.130ng/m L,雌三醇（E3）0.023-0.069 ng/m L。检测E2的含量与文献报道的参考范围接近,检测E1和E3的含量在Quest Diagnostics提供的参考范围内。对青春前期（6-8岁）健康女童体内雌激素和确诊性早熟样本的E2进行比较,健康女童样本的E2浓度范围在0.038±0.010 ng/m L,而性早熟E2的浓度范围在0.140±0.066ng/m L。两组样品的E2浓度表现出显著性差异,说明了E2和性早熟之间存在一定关系,为性早熟的儿童监控体内雌激素含量提供了基础实验数据。