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目的：本项研究通过体内实验，旨在探讨模拟日光中UV照射所致皮肤光老化大鼠细胞凋亡和凋亡相关调控基因的表达情况，以及p38MAPK和核转录因子kappaB（NF-κB）信号传导通路在光老化发生机制中的作用；并研究针刺疗法在皮肤光老化的干预过程中的作用机制，以期发掘出对光老化有明确防治作用的针刺疗法。材料与方法：本研究采用UVA+UVB光源（40W紫外线灯管：UVB灯管5根，UVA灯管2根）照射大鼠背部皮肤制备大鼠皮肤光老化模型。每只大鼠均用电推剪剪除大鼠背部5.0cm×5.0cm区域内毛发，放置于自制紫外线灯箱中。适应环境饲养一周后，第2周开始每天照射2h，第3-7周每天照射4h，第8-13周每天照射6h，照射以5天为一个周期，间隔2天，再开始下一个周期，直至造模成功。采用针刺为实验因素，维生素E为阳性对照药，以皮肤组织中氧自由基含量、抗氧化酶类活力、细胞凋亡情况、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）表达及p38MAPK、NF-κB信号传导通路中相关基因和蛋白表达为效应指标进行体内实验。实验大鼠随机分为正常组、模型空白组、针刺组、维生素E组（简称VE组），各组于造模前分别进行针刺和外涂相应药物后进行紫外线照射；13周后处死动物，取背部皮肤组织检测以下指标：比色法检测丙二醛（MDA）、过氧化氢（H2O2）含量及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力；免疫组化法检测Bcl-2和Bax蛋白表达及凋亡阳性细胞数目；RT-PCR法检测c-Jun、c-Fos、p38MAPK、NF-κB、MMP-1mRNA表达；Western Blot法检测蛋白c-Jun、c-Fos、p38MAPK、NF-κB、MMP-1蛋白表达。结果：1.大鼠体征表现：正常组大鼠实验全程皮肤无明显改变，皮毛有光泽，活泼喜动，食欲佳，食量正常。模型空白组大鼠13周实验结束时皮毛光泽度下降，皮肤增厚，弹性丧失，出现宽而深的皱纹。针刺组和VE组上述表现均有不同程度的改善，其中针刺组效果更好。2.各组大鼠体重变化：实验第1周各组大鼠体重比较，无明显差异（P＞0.05）。在实验进行至第13周末时，各组大鼠体重比较具有明显差异。与正常组比较，各组大鼠体重均明显下降，其中以模型空白组下降最为明显（P＜0.01）；与模型空白组比较，各治疗组体重均明显升高，具有显著差异（P＜0.01）。3.大鼠皮肤组织SOD活性：与正常组比较，模型空白组大鼠SOD活性明显降低，差异有统计学意义（P＜0.01）；与模型空白组比较，针刺组和VE组SOD活性均升高，差异有统计学意义（P＜0.01）。4.大鼠皮肤组织MDA含量：与正常组比较，模型空白组大鼠MDA含量明显升高，差异有统计学意义（P＜0.01），而针刺组无显著性差异（P＞0.05）；与模型空白组比较，针刺组和VE组MDA含量均降低，差异有统计学意义（P＜0.01）。5.大鼠皮肤组织H2O2含量：与正常组比较，模型空白组大鼠H2O2含量显著升高，差异有统计学意义（P＜0.01）；与模型空白组比较，针刺组H2O2含量降低，差异有统计学意义（P＜0.01），而VE组无显著性差异（P＞0.05）。6.大鼠皮肤组织CAT活性：与正常组比较，模型空白组大鼠CAT活性明显降低，差异有统计学意义（P＜0.01），而针刺组无显著性差异（P＞0.05）；与模型空白组比较，针刺组CAT活性升高，差异有统计学意义（P＜0.01），而VE组无显著性差异（P＞0.05）。7.大鼠皮肤组织GSH-Px活性：与正常组比较，模型空白组大鼠GSH-Px活性明显降低，差异有统计学意义（P＜0.01）；与模型空白组比较，针刺组和VE组GSH-Px活性均升高，差异有显著意义（P＜0.01）。8.大鼠皮肤组织免疫组化染色结果：（1）大鼠皮肤组织Bcl-2和Bax蛋白平均灰度值：与正常组比较，模型空白组大鼠Bcl-2蛋白表达的平均灰度值增加，表明蛋白含量减少，差异有统计学意义（P＜0.01）；与模型空白组比较，针刺组和VE组蛋白表达的平均灰度值减弱，表明蛋白含量增加，差异有统计学意义（P＜0.01）；Bax蛋白表达呈相反趋势。（2）大鼠皮肤组织凋亡阳性细胞数：正常组皮肤组织凋亡细胞存在散在阳性表达，模型空白组呈弥散阳性表达，凋亡阳性细胞数与正常组比较差异有统计学意义（P＜0.01）；针刺组和VE组均呈散在阳性表达，凋亡阳性细胞数与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。9.RT-PCR结果：正常大鼠皮肤组织可检测到c-Jun、c-Fos mRNA、p38MAPK、NF-κB、MMP-1表达。（1）c-Jun mRNA表达：与正常组比较，模型空白组表达明显升高（P＜0.01）；与模型空白组比较，针刺组和VE组表达显著下调（P＜0.01）；针刺组和VE组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。（2）c-Fos mRNA表达：与正常组比较，模型空白组表达明显升高（P＜0.01）；与模型空白组比较，针刺组和VE组表达显著下调（P＜0.01）；针刺组和VE组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。（3）p38MAPK、NF-κB、MMP-1mRNA表达：与正常组比较，模型空白组表达明显升高，（P＜0.01）；与模型空白组比较，针刺组和VE组表达均显著下调，差异有统计学意义（P＜0.01）。10.Western blot结果：正常大鼠皮肤组织可检测到c-Jun、c-Fos、p38MAPK、NF-κB和MMP-1蛋白表达。（1）c-Jun蛋白表达：与正常组比较，模型空白组表达明显升高（P＜0.01）；与模型空白组比较，针刺组和VE组表达显著下调，差异有统计学意义（P＜0.01）。（2）c-Fos蛋白表达：与正常组比较，模型空白组表达明显升高（P＜0.01）；与模型空白组比较，针刺组和VE组表达显著下调（P＜0.01）差异有统计学意义（P＜0.01）。（3）p38MAPK、NF-κB、MMP-1蛋白表达：与正常组比较，模型空白组表达明显升高（P＜0.01）；与模型空白组比较，针刺组和VE组表达显著下调（P＜0.01）；针刺组和VE组比较，针刺组NF-κB和MMP-1蛋白下调更为显著，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：1.针刺可用于防治大鼠皮肤光老化，能降低光老化大鼠皮肤组织氧自由基含量，提高抗氧化酶类活性。2.针刺可下调大鼠光老化皮肤组织促凋亡基因Bax蛋白表达、上调凋亡抑制基因Bcl-2蛋白的表达，从而减少皮肤细胞凋亡数目，这是实现针刺抗皮肤光老化的主要机制之一。3.UV照射活化了皮肤组织p38MAPK，激活了MAPK信号传导通路，进而导致MMP-1升高；同时，UV辐射形成的ROS，激活了下游NF-κB信号传导通路，也能上调靶基因MMP-1的表达，使细胞外基质成分降解，形成皮肤光老化。4.针刺对抗皮肤光老化途径之一是抑制皮肤组织p38MAPK和NF-κB表达，进而降低MMP-1生成，阻止其降解细胞外基质成分，起到抗皮肤光老化的作用。