[背景和目的]:实体肿瘤生长及转移需要血管生成。当肿瘤结节生长到1～2mm~3以后,肿瘤必须有新生血管生成供给营养才能继续增殖和转移。肿瘤细胞可分泌多种血管生成因子诱导血管生成,其中以血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor)的作用最为突出,VEGF可在乳腺癌,胃癌及结肠癌等多种实体肿瘤组织中广泛表达。胃癌是严重危害人民健康的疾病,发病率占消化系统恶性肿瘤的首位。在我国,胃癌死亡率为25.16/10万,占恶性肿瘤死亡率的23.02%,居各类癌症死亡的首位。临床早期胃癌的检出率不到10%,大部分临床手术病例为进展期胃癌,经淋巴管播散其是主要转移途径,因此淋巴结转移是影响患者预后的主要因素之一,但胃癌淋巴转移的分子生物学机制尚未阐明。VEGF-C及VEGF-D作为淋巴管生成因子,可与表达于淋巴管内皮细胞的VEGFR-3结合,导致淋巴管生成、增生、扩张,从而促进肿瘤细胞向区域淋巴结转移的一条通路。目前多采用检测组织中VEGF-C,VEGF-D的表达来了解其和胃癌淋巴道转移及侵袭的关系,能否在通过检测胃癌病人外周血及组织中VEGF-C,D的浓度来了解胃癌淋巴道转移及侵袭的关系,并为手术方式的确定和后续治疗提供依据成为人们研究的热点。本研究旨在探讨血清及组织中VEGF-C,D水平,应用统计学方法分析其和进展期胃癌淋巴道转移与侵袭的关联。方法:实验共分三组,进展期胃癌病例88例,分为淋巴结转移阳性(N=50)及阴性组(N=38),早期胃癌组(N=10),正常对照组(N=10)。第一阶段:确定设计方案、研究对象和标本收集。第二阶段:ELISA法检测三组血清中VEGF-C、D表达水平。研究对象:主要是定出研究对象的纳入和排除标准。研究对象的纳入标准:为未作放、化疗的进展期胃癌和早期胃癌手术患者(进展期胃癌和早期胃癌的诊断通过术后病理结合术前胃镜检查证实),有手术指征、无手术禁忌症。对照组为胃溃疡病人。研究对象的排除标准:非手术的胃癌患者,术前经过放、化疗的进展胃癌患者。有近期手术、类风湿性关节炎、创伤及肝肾功能异常为排除对象。应用人VEGF-C、D ELISA检测试剂盒检测血清VEGF-C、D的水平,抽取外周静脉血5mL,分离血清,避免溶血,-70℃保存备用,严格按照试剂说明书进行。第三阶段:采用EnVison TM两步法检测上述三组病例组织中的VEGF-C、D表达(胃癌组组织取自肿瘤中央,对照组组织取自溃疡周围正常胃粘膜)。标本收集:临床手术中切取标本1×1×2cm,然后石蜡包埋、切片,制成4μm厚切片备用。DAKO EnVision显色系统检测上述三组病例组织中的VEGF-C、D表达,同时对伴淋巴结转移组和不伴淋巴结转移组进行两组VEGF-C、D蛋白表达率的比较,了解其对进展期胃癌的淋巴结转移的影响。结果:1.进展期胃癌患者血清VEGF-C和VEGF-D水平明显高于对照组(P＜0.05),与早期胃癌组比较,差异无显著性(P＞0.05)。2.进展期胃癌患者血清VEGF-C高水平表达与淋巴结转移有关(P＜0.05),进展期血清VEGF-D高水平表达与淋巴结转移无关(P＞0.05)。3.在进展期胃癌组织中,VEGF-C、D呈阳性表达,阳性表达率分别为:52.5%,62.5%。与早期胃癌组及对照组比较,进展期胃癌中VEGF-C、D阳性表达率更高(P＜0.05)。4.在伴淋巴结转移的进展期胃癌中,VEGF-C阳性表达率较无淋巴结转移者更高,差异有显著性(P＜0.05);VEGF-D阳性表达率在伴淋巴结转移的进展期胃癌中与无淋巴结转移者比较,差异无显著性(P＞0.05)。结论:血清VEGF-C可作为进展期胃癌的标记物,对术前判定淋巴结转移具有一定的临床价值;进展期胃癌组织中有VEGF-C、D阳性高表达,组织VEGF-C的表达与进展期胃癌淋巴结转移密切相关,但VEGF-D的表达与进展期胃癌淋巴结转移无关。