电针对薄型子宫内膜大鼠蜕膜巨噬细胞M1/M2极化水平调节的效应研究

来源 :南京中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hjy276756267
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研究背景子宫内膜蜕膜化是胚胎植入的重要前提,也是子宫内膜为妊娠进行的一系列生理变化过程。充分的蜕膜化水平对胚胎顺利植入具有重要的意义。胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)是蜕膜化水平的标志蛋白。蜕膜化水平受许多因素的影响,巨噬细胞M1/M2的极化水平就是影响因素之一。较多的M1型巨噬细胞会抑制内膜的蜕膜化,并导致不良的妊娠结局。与之相反,较多的M2型巨噬细胞则有利于子宫内膜蜕膜化水平,同时防止母体对胎儿的排异反应,确保妊娠过程的顺利。M1型巨噬细胞主要的表面标记物包括IL-12以及CD86等;而CD206则是M2型巨噬细胞的主要表面标记物。已有多项研究表明,针灸对多种组织的巨噬细胞极化具有调节作用。但有关针灸是否能对子宫内膜蜕膜组织的巨噬细胞极化水平产生调节作用仍尚属未知。研究目的对薄型子宫内膜模型大鼠进行电针干预,观察电针对薄型子宫内膜的修复作用以及蜕膜化程度的影响;探讨电针调节子宫内膜中巨噬细胞M1/M2极化水平的促蜕膜化效应机制。研究方法取健康SPF级性成熟雌性SD大鼠30只与雄性SD大鼠10只,雌性SD大鼠采用随机数字表法将其分为空白组,模型组与电针组。空白组不予造模,正常采食、饮水;模型组于动情期采用宫腔灌注95%乙醇方法造模,造模结束后每日抓取固定;电针组于动情期采用宫腔灌注95%乙醇方法造模,造模结束后次日起每日电针“关元”穴、单侧“子宫”穴、单侧“三阴交”穴。连续干预4个动情周期后开腹取子宫。记录子宫中着床胚胎的数量,采用HE染色法观察子宫内膜组织形态和蜕膜化水平,内膜厚度,腺体及血管数;流式细胞术检测巨噬细胞极化水平;免疫组化法检测IL-12,CD206的表达;qRT-PCR检测IGFBP-1,CD86,CD206基因的表达水平。研究结果观察各组大鼠的妊娠情况可知,与空白组相比,模型组大鼠胚胎数量明显下降(P<0.01);与模型组相比,电针组大鼠胚胎数量有所增加(P<0.05)。HE染色结果显示:与空白组相比,模型组大鼠子宫内膜厚度明显变薄(P<0.01);与模型组相比,电针组大鼠子宫内膜厚度有所上升(P<0.01)。与空白组相比,模型组大鼠子宫内膜腺体数量明显减少(P<0.01);与模型组大鼠相比,电针组大鼠子宫内膜腺体数量有所增多(P<0.01)。与空白组相比,模型组大鼠子宫内膜血管数量明显减少(P<0.01);与模型组大鼠相比,电针组大鼠子宫内膜血管数量有所增多(P<0.01)。流式细胞术结果显示:空白组中,巨噬细胞以M2型巨噬细胞为主;与空白组相比,模型组大鼠M1型巨噬细胞占比显著增加(P<0.01),M2型巨噬细胞占比显著减少(P<0.01);与模型组相比,电针组大鼠M1型巨噬细胞占比明显降低(P<0.01),M2型巨噬细胞占比显著减少,差异不具有统计学意义。免疫组化结果显示:与空白组相比,模型组大鼠子宫内膜IL-12阳性区域面积占总面积百分比明显增多(P<0.01)。与模型组大鼠相比,电针组大鼠子宫内膜IL-12阳性区域面积占总面积百分比有所减少(P<0.01)。与空白组相比,模型组大鼠子宫内膜CD206阳性区域面积占总面积百分比明显减少(P<0.01)。与模型组大鼠相比,电针组大鼠子宫内膜CD206阳性区域面积占总面积百分比有所增加(P<0.01)。qRT-PCR结果显示:与空白组大鼠相比,模型组大鼠子宫内膜IGFBP-1基因mRNA的相对表达量明显降低(P<0.01)。与模型组大鼠相比,电针组大鼠子宫内膜IGFBP-1基因mRNA的相对表达量显著上升(P<0.01)。与空白组大鼠相比,模型组大鼠子宫内膜CD86基因mRNA的相对表达量明显升高(P<0.01)。与模型组大鼠相比,电针组大鼠子宫内膜CD86基因mRNA的相对表达量显著降低(P<0.01)。与空白组大鼠相比,模型组大鼠子宫内膜CD206基因mRNA的相对表达量明显降低,(P<0.01)。与模型组大鼠相比,电针组大鼠子宫内膜CD206基因mRNA的相对表达量稍有上升,差异不具有统计学意义。结论电针不仅能调节子宫内膜中巨噬细胞M1/M2极化水平,使巨噬细胞朝M2方向极化;也能促进薄型子宫内膜恢复厚度,从二者共同促进子宫内膜的蜕膜化,有利于胚胎着床。
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