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致病性大肠杆菌是引起新生犊牛腹泻的主要病原菌,其具有的强传染性与高致死率给养殖业造成严重经济损失。前期研究表明:蒙兽药巴布-7可调理肠道菌群,对E.coli O1腹泻犊牛有良好治疗效果。因此,为了解蒙兽药巴布-7治疗犊牛腹泻的机制,用其有效成分的正交设计复方:蒙兽药巴布-7有效成分复方(Effective ingredients compound of Babu seven,BSEIC)对以E.coli O1所致腹泻犊牛为模型动物,进行早期干预治疗,来深入探讨该复方对腹泻犊牛的影响及调理肠道菌群、改善肠道屏障功能的机制,推进替抗蒙药资源的开发利用提供新思路新途径。试验设计如下:将体况相近的48头初生荷斯坦犊牛分为6组:空白对照组(NC,生理盐水,n=8)、感染组(EC,生理盐水+E.coli O1,n=8)、抗生素组(CIP,环丙沙星+E.coli O1,n=8)、蒙兽药巴布-7有效成分复方低剂量组(BSEIC-L,低剂量+E.coli O1,n=8)、中剂量组(BSEIC-M,中剂量+E.coli O1,n=8)、高剂量组(BSEIC-H,高剂量+E.coli O1,n=8),连续灌药7 d,2次/d,除NC组的其他5组在第5 d晨饲前口服致病性大肠杆菌E.coli O1(2.50×1011CFU/m L,100m L/头)。于试验前1 d、试验7 d晨饲前称体重;每日记录腹泻情况,统计粪便指数,计算腹泻率;于第7 d末次给药1 h后进行全血、血清、肠道组织与结肠内容物样品采集。试验方法及结果如下:试验1研究BSEIC对犊牛结肠肠道微生物菌群的影响:采用16s RNA基因测序分析方法检测犊牛结肠肠道菌群结构。结果表明:E.coli O1的侵袭会导致犊牛结肠肠道菌群失调,生物屏障功能受损。BSEIC-M和BSEIC-H组能通过降低Simpson指数、提高shannon、Ace与Chao指数,显著增加物种丰富度与多样性(P<0.05);降低变形菌门、肠杆菌与粪杆菌属等的相对丰度(P<0.05);在微生物门水平上显著提高优势菌门:厚壁杆菌门(P<0.05)与拟杆菌门相对丰度,科水平上提高乳酸杆菌科、瘤胃球菌科与双歧杆菌科的相对丰度,属水平上可显著提高乳酸杆菌属、拟杆菌属(P<0.05)、布劳蒂亚菌属、双歧杆菌属与丁酸球菌属的相对丰度。试验2研究BSEIC对腹泻犊牛生长性能的影响:记录试验犊牛腹泻率、体重以及平均日增重数据,并进行血液生理生化指标检测。结果表明:(1)与EC组相比,BSEIC-M和BSEIC-H组能有效维持与增加体重、减少腹泻率(P>0.05),而CIP组虽然具有降低腹泻率作用(P<0.05),但使犊牛体重显著和极显著降低(P<0.05,P<0.01);(2)与EC组相比,BSEIC各组血常规指标均在正常范围内且能与NC组持平(P>0.05);(3)与EC组相比,BSEIC各组生化指标均在正常范围内且能与NC组持平(P>0.05)。试验3研究BSEIC对腹泻犊牛肠道机械屏障的影响:对犊牛小肠组织形态进行HE病理检查、透射电镜犊牛空肠TJ超微结构观察,免疫组化法计算空肠组织中这些蛋白的阳性表达量、ELISA法检测小肠紧密连接蛋白水平予以映证。结果表明:(1)感染E.coli O1后,引起犊牛肠绒毛与微绒毛损伤且肠黏膜TJ受损,紧密连接细胞间隙增加,而BSEIC各组使E.coli O1破坏的肠道结构得以恢复;(2)E.coli O1使肠道紧密连接蛋白水平显著下降(P<0.05),而与EC组相比,BSEIC-M和BSEIC-H组可显著提高紧密连接蛋白水平(P<0.05)。试验4研究BSEIC对腹泻犊牛免疫功能的调理作用:采用流式细胞术检测犊牛外周血淋巴细胞百分比含量,ELISA法检测血清抗炎免疫因子、小肠肠神经递质水平。结果表明:(1)BSEIC各组可使腹泻犊牛外周血中CD3+T、CD4+T、CD21+B与CD4+/CD8+T的比值显著提高(P<0.05),CD8+T与CD14+单核细胞的水平显著降低(P<0.05)且接近NC组的正常水平(P>0.05);(2)EC组犊牛血清中TNF-α、IL-1、IL-6的含量较NC组显著升高,IFN-γ、IL-2、IL-4含量均显著降低(P<0.05),而BSEIC-M和BSEIC-H组可与NC组持平(P>0.05);(3)EC组犊牛小肠Ach、5-HT水平显著升高,DA水平显著降低(P<0.05)。而BSEIC-M组可纠正致病性E.coli O1造成的犊牛肠神经递质异常与EC组相比具有显著差异(P<0.05),且均能与正常组持平(P>0.05)。结论:BSEIC能基于原有的抑菌特性有效抑制肠道致病性大肠杆菌繁殖,通过增加结肠有益菌群丰富度,改善肠黏膜屏障的保护功能,降低腹泻率、保证犊牛的营养摄入、利于体重的维持与增加,对腹泻犊牛的早期干预治疗呈现良好效果。为蒙药及其成分复方替代抗生素,治疗犊牛腹泻病提供参考依据。