山西省北部地区鸡大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

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致病性大肠杆菌是目前对养殖业危害最为严重的病原菌之一,血清型种类繁多,且分布广泛是客观存在的现实,而抗生素的使用又是防治致病性大肠杆菌的重要手段。近年来,随着各类抗生素的滥用,大肠杆菌对抗生素的耐药率不断上升,且多重耐药已经出现在多种抗生素中,使得抗生素的耐药机制变得日趋复杂。对大肠杆菌中的各类抗生素药物质粒介导耐药基因进行流行病学检测与鉴定,有利于进一步了解大肠杆菌耐药性的分子机理,指导临床用药。本研究主要包括以下内容:1.大肠杆菌血清型分布及各类药物耐药基因的流行性检测。为了解山西北部地区禽源致病性大肠杆菌的流行及各抗生素类耐药基因的分布情况,对2010年以来分离的218株禽源致病性大肠杆菌进行了病原菌的分离、血清型鉴定及耐药性PCR检测。结果发现:分离到281株大肠杆菌属于15种不同血清型,28株属于5种优势血清型,即01、8.078、84和0143:所有分离菌株对13种抗菌药物均有不同程度的耐药性,qnrA、tetM、tetA、sul2、strA、aadA、floR为检测到的主要耐药基因。2.耐药基因的质粒结合转移及耐药基因PCR扩增。根据试验一的结果,以13株临床分离大肠杆菌作为供体菌,利福平抗性E.coliNK5449用作受体菌,试验方法参考膜过滤接合法(Filter Mating Method)进行。确定接合子对qnrA、tetM、tetA、sul2、strA、aadA、floR77种抗菌药物的敏感性。试验结果显示:7种耐药基因都转移到了受体菌E.coli NK5449中,表明本次分离株所含耐药基因可以由质粒介导,并且可以通过质粒的结合转移进行耐药性的传播。
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