【摘 要】
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巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)又称为集落刺激因子-1,是造血系统重要的细胞因子.为研究核内M-CSF的功能,该文采取定位表达的方法使M-CSF在细胞核内表达,研究对细胞功能的影响.
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)又称为集落刺激因子-1,是造血系统重要的细胞因子.为研究核内M-CSF的功能,该文采取定位表达的方法使M-CSF在细胞核内表达,研究对细胞功能的影响.该文采用了真核表达质粒pCMV/myc/nuc,该质粒在插入片段末端连接三个核定位信号(NLS)编码序列,使表达的重组蛋白C端融合三个NLS信号肽,赋予重组蛋白强入核信号从而定位表达于核内.该文选取两株永生细胞系:小鼠成纤维母细胞系NIH3T3和人EB病毒转化的类淋巴母细胞系LCL-H,通过转染和G418筛选、建立稳定表达核M-CSF的细胞系以研究核M-CSF对细胞生物学活性的影响.肿瘤细胞的另一特性是逃逸凋亡.用细胞毒药物阿霉素处理细胞,检测细胞表面PS(凋亡)和碘经丙锭(PI)染细胞核(死亡)研究细胞的调亡情况.结果表明LCL-M比对照细胞的抗凋亡能力高.提供自我生长信号,对生长抑制信号失敏,凋亡逃逸,组织浸润和转移,持续的血管新生和无限的复制增生是恶性细胞共有的特征.该文对两种细胞核内M-CSF的研究表明:核内M-CSF在肿瘤细胞发生中的促进因子作用.实验结果与病理学研究结果一致.
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