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目的:提取测定桦褐孔菌多糖,检测桦褐孔菌多糖对小鼠免疫细胞细胞因子mRNA表达,以及对细胞因子分泌的影响,为阐明桦褐孔菌多糖的免疫调节作用及其机制提供实验依据。方法:称取桦褐孔菌原药材粉碎处理,用蒸馏水浸泡12h后,用蒸馏水加热提取两次,过滤,合并滤液浓缩,醇沉两次,过滤,合并沉淀,将所得沉淀完全溶解于蒸馏水中,活性炭脱色,过滤,滤液中加入三氯乙酸脱蛋白后,将滤液透析处理,浓缩,冷冻干燥至粉末,称重后于-20℃保存,用时蒸馏水溶解。通过培养Raw264.7细胞株,分离培养小鼠腹腔巨噬细胞和小鼠脾脏细胞,用RT-PCR方法测定并筛选出适合的给药剂量和给药时间,在给药剂量和给药时间一定的条件下,用RT-PCR方法测定桦褐孔菌多糖对细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α的mRNA表达的影响,所得电泳结果图用ImageJ2x软件进行灰度分析比较,并用SPSS19软件进行统计学分析,再收集48h的Raw264.7细胞株上清液进行ELISA检测,得标准曲线后计算所分泌的细胞因子TNF-a和IL-1p的浓度,并用SPSS19软件进行统计学分析。结果:从1965.98g桦褐孔菌原药材中,提取得到10.28g的多糖,采用外标法,测得桦褐孔菌多糖含量为41.83μg/mL (836.6mg/g)。通过检测桦褐孔菌多糖对LPS刺激后的Raw264.7细胞株促炎细胞因子IL.-6的mRNA表达抑制,得出40μg/mL作用6h为桦褐孔菌多糖的最佳给药浓度和给药时间。桦褐孔菌多糖(40μg/mL)对LPS或PMA刺激6h后的Raw264.7细胞株、小鼠腹腔巨噬细胞和小鼠脾脏细胞促炎细胞因子TNF-α、IL-1β的mRNA表达均有明显抑制(P<0.05)。桦褐孔菌多糖(40μg/mL)对LPS刺激48h后的Raw264.7细胞株促炎细胞因子TNF-α、IL-1β的分泌均有明显抑制(P<0.05)结论:1.通过浸提、醇沉、透析、冷冻干燥等技术,可从桦褐孔菌原药材中获得桦褐孔菌多糖。2.40μg/mL桦褐孔菌多糖作用6h,对LPS刺激后的Raw264.7细胞株促炎细胞因子IL-6的mRNA表达有明显的抑制作用。3.40μg/mL桦褐孔菌多糖作用6h,对LPS或PMA刺激后的Raw264.7细胞株、小鼠腹腔巨噬细胞和小鼠脾脏细胞促炎细胞因子TNF-α、IL-1β的mRNA表达均有明显的抑制作用。4.40μg/mL桦褐孔菌多糖作用48h,对LPS刺激后的Raw264.7细胞株促炎细胞因子TNF-α、IL-1β的分泌均有明显的抑制作用。