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目的:研究单独及联合过量摄入VitA、Zn对大鼠动情周期、卵巢组织抗氧化能力及卵巢细胞凋亡相关蛋白的影响,明确VitA与Zn之间的联合作用,为合理补充VitA、Zn提供实验依据。
方法: 72只动情周期正常的健康SD雌性大鼠,随机分为6组。正常对照组(CG);Zn实验组(ZnG);VitA实验组(VitAG);VitA和Zn联合实验Ⅰ组((VitA+Zn)Ⅰ G);VitA和Zn联合实验Ⅱ组((VitA+zn)Ⅱ G);VitA和Zn联合实验Ⅲ组((VitA+Zn)ⅢG)。每天灌胃给予各组大鼠0.5ml相应受试物,CG:去离子水;ZnG:含Zn 40mg/kg.bw(20倍);VitAG:含VitA 20000IU/kg.bw(30倍);(VitA+Zn)Ⅰ G:分别含VitA6666.67IU/kg.bw(10倍)、Zn 40mg/kg.bw(20倍);(VitA+Zn)Ⅱ G:分别含VitA20000IU/kg.bw(30倍)、Zn 40mg/kg.bw(20倍);(VitA+Zn)ⅢG:分别含VitA33333.33IU/kg.bw(50倍)、Zn 40mg/kg.bw(20倍)。试验期间用阴道脱落细胞涂片法观察大鼠动情周期。在实验第30天处死动物,采集腹主动脉血,分离卵巢,检测血清和卵巢组织中VitA及Zn含量;血常规;肝功能;卵巢组织抗氧化能力(超氧化物歧化酶SOD、谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px、总抗氧化能力T-AOC、丙二醛MDA);卵巢细胞流式凋亡双染及凋亡相关蛋白(Bcl-2蛋白、Bax蛋白)。
结果:单独及联合过量摄入VitA(10倍、30倍、50倍)、Zn(20倍)均可提高大鼠血清及卵巢组织中VitA或Zn的含量,联合中剂量(VitA30倍、Zn20倍)对机体产生的损伤作用表现最为明显;可观察到大鼠子宫内膜出现角化过度、角质化现象;大鼠动情周期延长,动情周期异常率增加;血清及卵巢组织中SOD、GSH-Px酶活力降低;同时卵巢细胞中Bcl-2蛋白表达量显著降低、Bax蛋白表达量显著增加,导致卵巢细胞凋亡的发生。
结论:
1.VitA与Zn在大鼠体内吸收存在协同作用。联合过量摄入VitA(10倍、30倍、50倍)、Zn(20倍)对机体的损伤作用比单独过量时大。VitA和Zn联合过量时对机体产生的不良影响以联合中剂量(VitA 30倍、Zn 20倍)表现最为明显。
2.VitA、Zn的单独及联合过量对大鼠子宫内膜有一定损伤作用,可观察到角化过度、角质化现象;并且影响大鼠的性激素分泌,导致大鼠动情周期延长,动情周期异常率增加。
3.VitA、Zn的单独及联合过量可增强卵巢氧化应激,使卵巢抗氧化能力下降,并不同程度促使卵巢细胞Bcl-2蛋白表达下调、Bax蛋白表达上调,导致卵巢细胞凋亡的发生。