产聚赖氨酸菌株的筛选和发酵工艺的研究

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ε-聚赖氨酸是一种由微生物大量生产的氨基酸同型聚合物,它是由L-赖氨酸的ε-氨基与另-L-赖氨酸的α-羧基形成的ε-酰胺键连接而成,通常由25~30个赖氨酸单体组成,相对分子量在3500~4500之间。ε-聚赖氨酸具有广谱抑菌性,能够抑制革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌和一些耐热性芽孢杆菌等,并且稳定性强,安全高效,是一种天然生物防腐剂。 运用了一种灵敏便捷的高通量筛选ε-聚赖氨酸产生菌的方法,通过在SG培养基中添加150mg/L的重铬酸钾以利于放线菌的富集分离,并在培养基中添加0.002%的美蓝,利用产碱菌株的分泌物与美蓝的静电作用而形成的独特的透明圈初筛得到产碱菌株,利用Dragendorff反应复筛得到生物碱产生菌。最后对生物碱产生菌的发酵液进行ε-聚赖氨酸的分析鉴定,得到了3株ε-聚赖氨酸产生菌,其中NG4菌株的相对产量最高。对NG4菌株进行了形态特征和生理生化特征的研究,初步鉴定为白色链霉菌。 优化了摇瓶发酵培养条件,确定了适合实验摇瓶培养基(g/L):葡萄糖50,(NH4)2SO4.10,K2HPO41,KH2PO41.5,MgSO4·7H2O 1,酵母膏5,初始pH为6.0。确定了摇瓶发酵最佳条件:培养温度30℃,装液量50mL,接种量8%,72h。 研究了不同搅拌速率对NG4菌株产ε-聚赖氨酸的影响,结果显示350rpm为最佳搅拌转速。研究了不同pH值在搅拌速率为350rpm时对菌株产ε-聚赖氨酸的影响。结果显示在pH4.0可获得最高产量2.85g/L。
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