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背景:胆囊癌（Gallbladder carcinoma）是最常见的胆道系统恶性肿瘤,占消化系统恶性肿瘤的第五位。胆囊癌恶性程度很高,5年存活率低于5%。肿瘤高度恶性的生物学行为及早期诊断困难是胆囊癌患者预后不佳的主要因素。胆囊癌放射性治疗效果不显著,手术难以达到根治性切除。因此,进一步研究新的有效的治疗方法是必要的,比如新的化疗药,介入治疗和基因治疗。苦参是传统中药,含多种生物碱,已广泛应用于临床。其有效成分具有抗寄生虫、抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗肝损伤等药理作用,并有一定的调节免疫作用。苦参碱是其有效活性成分之一,其分子式C15H24N20。现在的研究发现,苦参碱能够抑制肿瘤细胞增殖及诱导肿瘤细胞凋亡,其作用已经在宫颈癌、淋巴瘤、胃癌、肝癌、乳腺癌及肺癌中证实,尽管如此,目前尚无研究探讨苦参碱抗胆囊癌细胞的作用及机制。本研究以不同浓度苦参碱及两个时间点位作用于人胆囊癌细胞株GBC-SD,观察不同浓度及不同时间点苦参碱对GBC-SD细胞增殖、凋亡影响及机制。目的:苦参碱（Matrine,Mat.）是从豆科植物苦参（Sophora flavescens Ait.）,苦豆子（s.alopecuroides L）,广豆根（s.subprostrata Chun et T.Chen）等中分离出来的生物碱,是白金雀儿碱（lupanine）的异构体,属于四环的喹诺里西啶类（quinolizidine）,分子式为C15H24N20。本实验的目的是研究苦参碱对人胆囊癌细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用,并探讨其机制。方法:不同浓度的苦参碱（0.125,0.25,0.5mg/mL）作用于人胆囊癌GBC-SD细胞24,.48小时。细胞增殖抑制试验（MTT方法）观察不同浓度苦参碱对胆囊癌细胞增殖抑制的影响;流式细胞术检测细胞周期及凋亡;蛋白免疫印迹法（Western Blotting）检测不同药物处理后一些周期及凋亡相关蛋白表达水平的变化,包括Cdk2,Cdk4,Cdk6,CyclinE,CyclinD1,bax,bcl-2,caspase-3。统计学处理用SPSS13.0软件完成,计量资料数据表示方式以平均值±标准差（Mean±SD）,两组计量资料采用非独立样本t检验,各组指标间的相关性采用Spearman等级相关分析。P＜0.05为差异有统计学显著性意义。结果:胆囊癌GBC-SD细胞经过苦参碱（0.125,0.25,0.5mg/mL）处理24,48h后,细胞增殖抑制实验（MTT）证实苦参碱能够抑制GBC-SD细胞的增殖,并且其抑制作用呈现剂量、时间依赖效应。利用流式细胞仪分析药物作用后的GBC-SD细胞,检测到G1期阻滞和凋亡。Western Blot结果显示苦参碱可以明显降低cyclinE、bcl-2的表达,以及检测到bax的表达上调,caspase-3的激活。结论:本实验以人胆囊癌细胞系GBC-SD为对象,研究苦参碱对胆囊癌细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。研究表明苦参碱可以明显抑制胆囊癌细胞的增殖,导致细胞G1期阻滞,其周期阻滞可能与苦参碱下调cyclinE的表达有关。同时苦参碱可能通过下调bcl-2,上调bax,增加bax与bcl-2比率,通过线粒体途径激发caspase级联反应,进一步诱导凋亡。但是仍然需要进一步研究明确bcl-2,bax和caspase-3在诱导胆囊癌细胞凋亡方面的具体作用,cyclinE的下调与caspase-3的激活有没有相关性仍然需要进一步的研究。并且需要进一步的动物体内试验及临床试验证实苦参碱抗胆囊癌的价值。