睾丸扭转是一种常见的泌尿外科急症,多见于青少年时期。睾丸扭转可引起睾丸内的血液循环发生障碍,需及时手术复位恢复血供,以防止睾丸的生精功能的受损。睾丸扭转复位是睾丸缺血再灌注损伤（IRI）主要的病理生理事件,即使手术复位的患者,术后仍有概率出现睾丸萎缩、生精功能下降,甚至导致男性不育。因此,扭转复位后睾丸IRI的治疗及预防已成为近年来男科学领域研究的热点。随着研究技术的不断发展,硫化氢（H2S）作为近年来新发现一类气体信号分子,被证明可参与人体内多种脏器的功能调节过程。GYY4137是一种新型的H2S缓释剂,与传统供体硫化氢钠（Na HS）相比,GYY4137能在生理环境的温度、酸碱度等条件下稳定地释放H2S,更加接近内源性硫化氢在体内的合成。据研究报道表明,GYY4137在许多器官的缺血再灌注损伤过程中能起到一定的调控作用,但在睾丸IRI中的功能及机制尚未见文献报导。因此本实验利用在动物和细胞模型上分别建立大鼠睾丸IRI模型和精原细胞的缺氧复氧模型,探究GYY4137在大鼠睾丸IRI的发生中产生的作用及其可能的机制。我们的实验结果显示:大鼠睾丸IRI模型中及缺氧复氧的细胞模型中,GYY4137均可发挥抑制降低细胞氧化应激水平、减轻细胞凋亡和炎症的损伤,从而在一定程度上发挥保护的作用。在此基础上,我们通过比较两种不同的给药方式,发现通过阴囊注射GYY4137的治疗效果优于传统腹腔注射。综合以上研究,我们对GYY4137在睾丸IRI中的作用及其机制进行了探究,为未来临床治疗睾丸扭转提供了新的思路。第一部分GYY4137对大鼠睾丸缺血再灌注损伤的作用研究目的:探究GYY4137对大鼠睾丸缺血再灌注损伤的保护作用方法:选取健康成年雄性SD大鼠40只随机分为5组,每组8只,分别为对照组（A组）、睾丸缺血再灌注损伤（IRI）模型组（B组）、IRI+50μmol/kg GYY4137处理组（C组）、IRI+100μmol/kg GYY4137处理组（D组）和IRI+150μmol/kg GYY4137处理组（E组）。A组为假手术组,B、C、D、E组大鼠建立单侧睾丸扭转复位模型,GYY4137采取腹腔注射,复位4h后处死大鼠收集标本。通过采用HE染色检测睾丸组织病理学改变;采用硫代巴比妥酸法、黄嘌呤氧化酶法测定丙二醛（MDA）及超氧化物岐化酶（SOD）含量;采用实时荧光定量PCR（q RT-PCR）检测Bax、Caspase-3、TNF-α和IL-1β的表达水平。结果:与A组相比,B组可见生精细胞广泛脱落坏死,上皮排列紊乱。与B组相比,C、D、E组睾丸缺血再灌注损伤引起的改变明显改善;与A组相比,B组中MDA含量显著上升,SOD含量显著下降;与B组相比,C、D和E组MDA含量明显下降,SDA含量显著上升,其中D组变化程度最为明显;PCR结果显示,B组中Bax和Caspase-3的表达水平较A组显著增加,同时TNF-α和IL-1β的表达水平也明显增高。与B组比较,C、D和E组Bax、Caspase-3、TNF-α和IL-1β的表达均有所下降,其中D组下降程度最为显著。结论:GYY4137对大鼠睾丸缺血再灌注损伤具有一定程度的保护作用,能有效降低细胞氧化应激水平、减轻细胞凋亡和炎症的损伤,而且这种作用与给药浓度有关,在100μmol/kg时保护作用最明显。第二部分GYY4137对精原细胞缺氧复氧损伤的作用研究目的:探讨GYY4137对缺氧复氧精原细胞损伤的保护作用。方法:建立精原细胞缺氧复氧损伤模型,在该条件下分别给予不同浓度（10、50、100μM）GYY4137进行干预,采用MTT法检测离体细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,q RT-PCR法检测Bax和caspase-3的表达情况。结果:与对照组相比,模型组的细胞活力明显下降,而GYY4137干预各组细胞的活力较模型组明显增高,其中50μM组增加最为明显;与对照组相比,模型组的细胞凋亡率明显增加,而GYY4137干预各组细胞的凋亡率较模型组有所下降,其中50μM组下降最为明显;模型组Bax和Capase-3的表达量较对照组明显上调,而GYY4137干预各组的Bax和Capase-3表达量较模型组有所下调,在浓度为50μM时下调最为明显。结论:GYY4137对细胞缺氧复氧损伤具有一定的保护作用,能有效降低细胞氧化应激水平、减轻细胞凋亡、增加细胞增殖水平,而且这种作用与给药浓度有关,在50μM时保护作用最明显。第三部分经腹腔及阴囊途径注射GYY4137对大鼠睾丸缺血再灌注损伤保护作用的对比研究目的:比较腹腔内与阴囊内注射GYY4137对大鼠睾丸缺血再灌注损伤的治疗作用。方法:选取健康成年雄性SD大鼠32只随机分为4组,每组8只:对照组（A组）、睾丸缺血再灌注损伤组（B组）、睾丸缺血再灌注损伤+GYY4137腹腔给药组（C组）、睾丸缺血再灌注损伤+GYY4137阴囊给药组（D组）。A组为假手术组,B、C、D组大鼠建立单侧睾丸扭转复位模型,C组和D组在复位时分别腹腔内和阴囊内注射GYY4137（100μmol/kg）。复位4小时后取左侧睾丸待测。HE染色观察睾丸组织病理改变;测定丙二醛（MDA）、超氧化物岐化酶（SOD）含量;以原位缺口末端标记法（TUNEL）检测生精细胞凋亡指数;采用免疫组织化学法、Western Blot法和q RT-PCR法检测睾丸组织中Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达水平。结果:B组可见生精细胞大量萎缩及坏死。与B组相比,C、D组明显改善睾丸缺血再灌注损伤引起的改变;与A组相比,B组中MDA含量显著上升,SOD含量显著下降;与B组相比,C和D组MDA含量明显下降,SDA含量显著上升,其中D组变化程度更为明显;B组细胞凋亡率较A组明显增高,与B组相比,C、D组细胞凋亡率显著下降,其中D组下降程度较明显;B组中Bax和Caspase-3的表达水平较A组显著增加,同时Bcl-2的表达水平明显降低;与B组相比,C和D组Bax和Caspase-3的表达降低均有所下降,Bcl-2的表达水平有所提高,其中D组改善程度较显著。结论:GYY4137对大鼠睾丸缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,阴囊内给药的疗效相较于腹腔内给药更佳,为未来睾丸扭转的治疗提供新的思路。