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目的:本研究通过不同浓度的雷帕霉素处理体外培养的人宫颈癌Hela细胞,观察雷帕霉素对Hela细胞增殖,以及HIF-1α及VEGF表达的影响。为宫颈癌的药物治疗方面提供新的思路和方法,为进一步研究雷帕霉素可否应用于宫颈癌的治疗提供重要的理论依据。方法:体外培养人宫颈癌Hela细胞株分实验组和对照组,实验组经不同浓度雷帕霉素作用72小时。MTT法检测细胞增殖抑制率,描述抑制率与药物浓度之间的关系。半定量RT-PCR法检测HIF-1α及VEGFmRNA表达的变化。Western Blot法检测HIF-1α及VEGF蛋白的表达变化。实验所得数据应用SPSS15.0系统统计分析软件进行处理。结果: 1.MTT结果显示:雷帕霉素可抑制人宫颈癌Hela细胞增殖,抑制率随药物浓度增加呈上升趋势,,最大抑制率在200ng/ml时可达(51.22±2.45)%,各实验组分别与对照组比较差异均有显著性,但各相邻浓度组间比较,12.5ng/ml组与25ng/ml组抑制率差异显著有统计学意义,其余各相邻浓度组间增殖抑制率虽然随药物浓度增加有上升趋势但无统计学意义(P>0.05)。2.RT-PCR结果显示:HIF-1αmRNA及VEGFmRNA均有一定量的表达,雷帕霉素可下调人宫颈癌hela细胞HIF-1α及VEGFmRNA的表达。各组HIF-1αmRNA表达与对照组比较差异均有显著性,低、中剂量组间HIF-1αmRNA表达差异有统计学意义;中、高剂量组之间HIF-1αmRNA表达差异性无统计学意义。低剂量组VEGFmRNA与对照组VEGFmRNA比较差异无统计学意义,低、中剂量组间VEGFmRNA表达差异有统计学意义;中、高剂量组间VEGFmRNA表达的差异性无统计学意义。3.Western Blot免疫蛋白印迹结果显示:分别在120KD和23KD的位置可见HIF-1α及VEGF的蛋白条带,各剂量组分别与相应的对照组比较结果显示:低剂量组HIF-1α蛋白,VEGF蛋白表达分别与相应对照组相比差异均无统计学意义(P=0.429,P=0.321);中、高剂量组HIF-1α,VEGF蛋白表达分别与相应对照组相比差异有显著性;低、中剂量组间及中,高剂量组间分别比较HIF-1α蛋白,VEGF蛋白表达差异性结果均有统计学意义。结论: 1.雷帕霉素可显著抑制人宫颈癌Hela细胞增殖,即使药物浓度很小也可有效抑制其增殖,最大抑制率可达(51.22±2.45)%,抑制作用不随药物浓度增加而显著增加,25ng/ml时药物的量效比达到最大。2.雷帕霉素可下调人宫颈癌Hela细胞HIF-1αmRNA及VEGFmRNA的表达,药物浓度在20ng/ml时抑制作用最明显。3.雷帕霉素下调人宫颈癌Hela细胞HIF-1α及VEGF蛋白的表达,药物浓度在20ng/ml时抑制作用明显,80ng/ml时抑制作用更明显。4.雷帕霉素可抑制人宫颈癌Hela细胞HIF-1α的表达并下调其下游基因VEGF的表达来抑制肿瘤血管形成从而控制肿瘤生长,可能成为宫颈癌治疗的另一新思路。