论文部分内容阅读
目的：制备穿膜肽介导的输送抗癌药物阿霉素的纳米给药系统，探索其在逆转肿瘤的多药耐药、及抑制耐药肿瘤生长方面的作用。制备低分子量鱼精蛋白（LMWP）修饰的PLGA纳米粒，负载一线抗癌药物阿霉素；并在体内外评价这种纳米载体在治疗肿瘤多药耐药方面的作用。方法：研究了LMWP应用于药物载体的优势，合成了烷基化的LMWP多肽，通过疏水作用力采用纳米沉淀法制备LMWP修饰的PLGA纳米粒（LMWP/PLGANP），负载阿霉素（LMWP/PLGA/Dox NP）。采用激光散射粒度仪对纳米粒的粒径及电位进行分析；用透射电子显微镜（TEM）观察纳米粒形态及分布；用透析法测定纳米粒的体外释药行为；使用荧光显微镜及流式细胞分析仪考察各实验组阿霉素的入胞能力；使用激光共聚焦显微镜分析各实验组阿霉素的入核能力；采用MTT法考察各实验组对敏感肿瘤细胞及耐药肿瘤细胞的增殖抑制效果；采用nu/nu裸鼠耐药乳腺癌模型考察LMWP/PLGA/Dox对多药耐药肿瘤的抑制效果及全身毒性。结果：通过单因素法优化制备了粒径为200nm左右的LMWP/PLGA/DoxNP。纳米粒Zeta电位为27mV左右，TEM显示纳米粒呈球状，均匀分布。纳米粒体外吸附蛋白（BSA）量较少，在血清中较稳定，48h未发现颗粒粒径变化。溶血实验证明了纳米粒较好的生物相容性，可供注射使用。细胞实验显示，LMWP修饰能够显著增强纳米粒进入细胞的能力，尤其体现在耐药细胞上；LMWP/PLGA/Dox NP也表现出了较好的核靶向功能。 MTT实验证明了LMWP/PLGA/Dox NP显著的对于肿瘤细胞（尤其是耐药肿瘤细胞）的增殖抑制效果。动物实验结果显示，LMWP修饰能够增强PLGA纳米粒穿透肿瘤的能力，显示出对多药耐药肿瘤较好的抑制效果；小鼠体重变化及病理切片结果证明，LMWP/PLGA/Dox NP无毒。结论：本研究构建的LMWP修饰的负载阿霉素的PLGA纳米给药系统在体内外实验中均表现出较好的逆转肿瘤多药耐药的效果，显示出较好的抑制肿瘤生长的能力。为肿瘤多药耐药的治疗提供了一种新策略。