去细胞异体神经复合甲状腺激素修复周围神经缺损的实验研究

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目的: 用化学法去除异体 SD 大鼠坐骨神经髓鞘和雪旺细胞,形成去细胞异体神经基膜管支架,然后复合上对神经再生有明显作用的甲状腺激素,桥接成年 Wistar 大鼠坐骨神经 1.0 cm 缺损,来进一步研究同种异体神经移植复合甲状腺激素修复周围神经缺损的可行性。 方法: 选用成年雌性 SD 大鼠 10 只作为供体神经,周龄 8 周,体重200~250g。将其双侧坐骨神经切断长约 1.2cm。按照化学法制备去细胞异体神经基膜管支架;组织学观察去细胞异体神经脱细胞、髓鞘的效果。外源性 T3经化学处理后形成无菌、PH 值中性的 T3水溶液然后溶解在明胶水凝胶中,局部注射在去细胞异体神经基膜管支架上。根据周围神经移植方法的不同,将 Wistar 大鼠随机分为 3 组,每组 10 只:去细胞异体神经基膜管复合甲状腺激素移植组(A)、去细胞异体神经基膜管移植组(B)和自体神经移植组(C),桥接 Wistar 大鼠坐骨神经 1.0 cm 的缺损。术后三组分别在 8 周、12 周进行形态学、坐骨神经功能指数(SFI)、神经电生理学、小腿三头肌湿重、光镜、透射电镜及图像分析检测。 结果: 在坐骨神经移植术后,三组均有一定程度的神经再生。应用单因素方差分析对三组进行统计学分析。结果显示:术后 8 周 SFI 比较,C组优于 A 组、B 组,差异有显著性(p<0.01),A 组和 B 组间比较无显著性差异(p>0.05)。术后 12 周,A 组和 C 组均优于 B 组,差异有显著性(p<0.01),A 组和 C 组间比较无显著性差异(p>0.05)。在运动神经传导速度(NCV)、相对电位恢复率、小腿三头肌湿重、远端再生有髓神经纤维截面积恢复率,8 周、12 周两时间点上,A 组、C 组均优于 B 组,差异有显著性(p<0.01),A 组和 C 组间比较无显著性差异(p>0.05)。透射电镜观察结果显示:在术后 12 周 A 组、C 组较 B 组有髓神经纤维百分比高、形态规则、直径粗、髓鞘厚、髓鞘不折叠或崩解、髓鞘发育良好、再生的神经纤维被神经束膜包绕,雪旺细胞增值活跃、胞浆中多见线粒体等细胞器。高倍镜下可见排列整齐的髓鞘板层状结构,A 组、C 组间比较无显著性差异。
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