目的:通过建立大鼠慢性应激模型,用辅酶Q10进行干预,观测大鼠实验性牙周炎发病过程,通过免疫组化的方法,对大鼠牙龈组织中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases MMPs)、和酶联免疫吸附试验的方法对大鼠血清中Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(C-terminal type I collagen telopeptide,CTX-I)进行测定,探讨辅酶Q10对慢性应激大鼠实验性牙周炎发病过程的影响,为辅酶Q10临床应用提供基础资料。方法:200g左右健康清洁级雄性Wistar大鼠48只,随机分成3组:空白牙周炎组(N组)、慢性应激牙周炎组(C组)及慢性应激辅酶Q10牙周炎(CQ组)。N组正常喂养,正常饮水;C组给予蒸馏水灌胃和不同的慢性应激;CQ组给辅酶Q10灌胃和不同的慢性应激;慢性应激和辅酶Q10给药6周后,每组的右侧下颌第一磨牙做实验性牙周炎模型,左侧做自身对照,且C组继续给予蒸馏水灌胃和不同的慢性应激,CQ组继续给辅酶Q10灌胃和不同的慢性应激。慢性应激模型的建立:采用随机数的方法将七种刺激随机安排到每周内,每日上午进行应激处理,每日1种刺激。七种刺激方式分别为:①束缚1h;②冲水1h;③禁食24h;④电子驱鼠器1h;⑤泡水1h;⑥禁水24h;⑦潮湿垫料24h。牙周炎模型的建立:以丝线结扎+黏性高糖饮食+饮自身粪便水法复制大鼠牙周炎模型。牙位是右侧下颌第一磨牙,每隔一天检查一次大鼠口腔情况,如果丝线有松动或脱落情况,重新进行结扎。分别于大鼠实验性牙周炎造模后的0、2、4、6周末的上午8点(且前一天禁食)观察测量N组、C组、CQ组的龈袋或牙周袋,对其进行检测并行统计学分析。随机选出四只处死,心脏取血,酶联免疫吸附法检测CTX-1并进行统计学分析;迅速取下下颌第一磨牙的牙龈,在10%多聚甲醛液中进行固定,经过一系列处理后做成切片:HE染色,400倍显微镜下观察组织学有何变化;天狼猩红染色,观察胶原纤维的情况;抗原修复后行免疫组化染色,光镜下观察,并对牙周组织中MMP-9进行测定和统计学分析。结果:1慢性应激动物模型的建立C组与CQ组给予慢性刺激2周后出现倦怠和体重增长缓慢现象,两组间有差异(P>0.05),C组、CQ组分别与N组比较,到第4周、第6周末体重差异更加显著(P=0.000)。2牙周炎动物模型的建立C组、N组、CQ组大鼠的左侧牙周组织在整个实验过程中都没有明显变化,右侧牙周组织在观测的2、4、6周平均牙周探诊深度出现了不同程度的变化:在0周和第2周末3组间以及第4、第6周末N组和CQ组间比较无统计学差异(P>0.05);在第4周末,N组、CQ组分别与C组比较平均牙周探诊深度出现差异(P=0.001),第6周末C组分别与N组、CQ组比较出现显著统计学差异(P=0.000)。3大鼠实验性牙周炎牙龈组织学检测结果3.1牙龈组织HE染色结果大鼠自第造实验性牙周炎模型,随着时间的延长,牙龈组织中成纤维细胞和血管内皮细胞增殖,炎性细胞的量在增多,牙龈上皮内出现了棘层增生以及上皮钉突的伸长。3.2牙龈组织天狼猩红染色结果在0时刻的牙龈组织中Ⅰ型胶原纤维较多、Ⅲ型胶原纤维可见、各组随着炎症的形成和不断加重Ⅰ型胶原纤维增多、Ⅲ型胶原纤维减少,其Ⅰ型与Ⅲ型胶原纤维的比值呈增高的趋势,但各组间未发现有明显差别。3.3牙龈组织中MMP-9免疫组化检测结果0周,3组间,第2、4、6周末N组和CQ组之间比较,MMP-9阳性细胞计数无差异(P>0.05);第2周末C组分别与N组和CQ组比较,MMP-9阳性细胞计数有显著差异(P=0.002)。第4、6周末C组分别与N组和CQ组比较有显著意义(P=0.000)。4实验性牙周炎大鼠血清中CTX-1 ELISA检测结果0周各组间,第2周、第4周和第6周末N组和CQ组之间无差异(P>0.05);第2周、4周、6周末C组分别与N组和CQ组之间比较有显著统计学差异(P<0.005)。结论:1本实验复制了大鼠慢性应激模型,成功的复制了大鼠慢性应激状态实验性牙周炎模型。2慢性应激可以减缓大鼠体重的增长;可加重大鼠实验性牙周炎的病损,尚未发现对实验性大鼠正常牙周组织影响的证据。3辅酶Q10干预缓解了慢性应激状态大鼠实验性牙周炎病变的病损程度。辅酶Q10干预缓解牙周病变程度可能与牙周组织MMP-9和血清CTX-1水平变化有关。