【摘 要】
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目的:该课题旨在研究汉防己甲素(Tetrandrine,Tet)和屈洛昔芬(Droloxifen,DRL)单独及联合应用对人慢性粒细胞白血病急性红白血病变细胞株K562及其耐药株K562/A02的bcr/abl mRNA和P<210>BCR/ABL的影响,以探讨它们逆转耐药的作用机理,为Tet和DRL作为耐药逆转剂的临床应用提供理论依据.方法:将有效逆转浓度的Tet(1μM)、DRL(5μM)和柔红霉素(Daunorubin,DNR)(1mg/L)单独及联合应用培养K562和K562/A02细胞一定时间后
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目的:该课题旨在研究汉防己甲素(Tetrandrine,Tet)和屈洛昔芬(Droloxifen,DRL)单独及联合应用对人慢性粒细胞白血病急性红白血病变细胞株K562及其耐药株K562/A02的bcr/abl mRNA和P<210>BCR/ABL的影响,以探讨它们逆转耐药的作用机理,为Tet和DRL作为耐药逆转剂的临床应用提供理论依据.方法:将有效逆转浓度的Tet(1μM)、DRL(5μM)和柔红霉素(Daunorubin,DNR)(1mg/L)单独及联合应用培养K562和K562/A02细胞一定时间后,分别采用逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和蛋白印迹(Westernblotting)检测细胞bcr/abl mRNA和P<210>BCR/ABL融合蛋白表达水平的变化.结果:(1)RT-PCR检测Tet、DRL和DNR单独及联合应用对bcr/abl mRNA的影响:①单独应用Tet、DRL和DNR对K562和K562/A02细胞株bcr/abl mRNA表达水平无明显影响.②Tet和DRL两药联合应用后,K562和K562/A02细胞株的bcr/abl mRNA表达水平于48h开始下调,72h下调作用更明显.③Tet、DRL和DNR三药联用于48h开始明显下调K562细胞株bcr/abl mRNA表达水平,72h时下调作用更显著.而于K562/A02细胞株中,于24h即开始下调bcr/abl mRNA的表达,48h及72h下调作用更显著.下调作用呈现时间依赖性.(2)Western blotting检测Tet、DRL和DNR单独及联合应用对P<210> BCR/ABL的影响:①单独应用Tet、DRL和DNR对K562和K562/A02细胞株P<210> BCR/ABL表达水平无影响.②Tet和DRL两药联合应用48h,对K562和K562/A02细胞株的P<210> BCR/ABL表达水平无下调,应用72h后可下调K562和K562/A02细胞株的P<210> BCR/ABL表达.③Tet、DRL和DNR三药联用于48h开始部分下调K562和K562/A02细胞株v BCR/ABL表达水平,但作用不明显,应用72h后明显下调K562和K562/A02细胞株的P<210> BCR/ABL表达.结论:有效逆转浓度的Tet和DRL联合应用时可下调bcr/abl mRNA和P<210> BCR/ABL表达,此可能参与两药联合逆转白血病耐药的机制.
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