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背景:慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)为西方国家最常见的一种白血病类型,特征为成熟的、典型的CD5+B淋巴细胞在骨髓、外周血、淋巴结和脾脏内恶性克隆增殖以及聚集。其临床表现、疾病进展、对治疗的反应和预后是高度可变的,因此早期预测患者的预后在CLL治疗时机的选择中发挥重要作用。到目前为止,已有研究发现MicroRNA(miRNAs)通过多种机制调控CLL的发生与发展,且被认为是疾病的重要预后因素。本课题组前期研究发现miR-181b在CLL患者中呈特异性低表达,通过生物信息学软件分析并结合文献报道预测CARD11为miR-181b的潜在靶基因,但关于miR-181b调控CARD11参与CLL作用机制的研究未见报道,仍需实验进一步证实。目的:检测CLL患者CD19+B淋巴细胞中miR-181b的表达水平,分析与预后相关性,探讨其在CLL的预后价值,为CLL的早期预测预后提供新的生物标志物;在体外试验中验证CARD11为miR-181b的靶基因,研究CLL中miR-181b与靶基因CARD11关系,为CLL今后的靶向治疗提供新靶点及理论依据。方法:1)收集2013年6月至2018年6月在新疆自治区人民医院诊治的CLL患者84例、健康对照组20例,应用磁珠分选研究对象外周血CD19+B淋巴细胞后进行RNA提取;2)通过逆转录实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测84例CLL患者miR-181b的表达,分析其在不同IPI分组中表达差异,探讨miR-181b表达水平与CLL患者预后相关性;3)通过双荧光素酶报告系统和western-blot证实miR-181b对靶基因CARD11的调控作用,使用RT-qPCR法检测靶基因CARD11在CLL中的表达水平,分析其与miR-181b表达水平的相关性。结果:1)miR-181b在CLL患者中表达显著低于对照组(P<0.01);2)(1)miR-181b在低危组的表达水平高于高危组和极高危组(p<0.05),但在低危组与中危组间表达无差异(p=1.00),中危组中miR-181b的表达水平高于高危组和极高危组(p<0.05),但在高危组与极高危组间表达无差异(p=1.00);(2)ROC曲线结果显示曲线下面积(AUC)为0.792(P<0.01),得出miR-181b表达水平处于分界值0.279时,具有较好的敏感性(62.9%)和特异性(91.8%);(3)生存分析结果显示miR-181b低表达组的CLL患者较miR-181b高表达组的患者预后更差(P=0.047);(4)Cox多因素回归分析结果提示Rai分期、p53异常、IGHV突变、miR-181b低表达是影响CLL患者生存的独立预后因素(P<0.05);3)(1)荧光素酶活性检测结果证明在CLL细胞系中,miR-181b能与CARD11的3’UTR区结合,抑制荧光素酶活性;RT-qPCR及western-blot结果表明miR-181b过表达降低了CARD11的mRNA和蛋白表达水平,而miR-181b低表达升高了CARD11的mRNA和蛋白表达水平,证明CARD11是miR-181b在CLL中的直接作用靶基因;(2)相关性分析结果提示miR-181b与CARD11 mRNA表达水平呈负相关(R=-0.8047,P<0.001)。结论:miR-181b在CLL患者中表达降低,对靶基因CARD11具有负向调控作用,其低表达与CLL不良预后有关,可作为CLL早期预测预后的新指标。