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目的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducting ligand,TRAIL)可诱导肿瘤细胞发生凋亡,然而相当数量的肿瘤细胞可耐受TRAIL诱导的凋亡而得以存活。将传统化疗或表观调节类药物(即增敏剂)与TRAIL处理相联合作用于肿瘤细胞,上调TRAIL的促凋亡效应也是目前TRAIL的研究重点之一。硫利达嗪(thioridazine,THZ)为一种多巴胺受体阻滞剂,广泛应用于精神分裂症的治疗,最近其被证实对多种肿瘤细胞具有抗增殖活性。本实验观察硫利达嗪通过诱导内质网应激介导的死亡受体5(Death receptor 5,DR5)表达上调,继而增敏TRAIL对肺腺癌细胞PC9的生长抑制及凋亡诱导效应,探讨其机制。方法不同浓度硫利达嗪处理PC9细胞,采用MTT法检测细胞活性变化,光镜观察不同浓度硫利达嗪对PC9细胞形态的影响,western blot检测内质网应激相关蛋白GRP78,CHOP,p-PERK,p-e IF2α,ATF4及凋亡相关蛋白Caspase-3,Caspase-9的表达水平;不同浓度硫利达嗪联合不同浓度TRAIL处理PC9细胞,MTT检测各组细胞存活率,计算各组联合指数并确定后续实验使用的浓度,采用流式细胞术检测硫利达嗪单独或联合内质网应激抑制剂4-PBA处理PC9细胞对细胞表面DR5表达的影响,检测TRAIL单独或联合硫利达嗪组以及4-PBA干预联合组的细胞凋亡率,采用western blot检测凋亡蛋白Caspase-8,PARP,DR5表达变化。结果硫利达嗪对PC9细胞的增殖抑制效应呈浓度依赖性(P<0.05),半数抑制浓度为(29.8±1.6)μmol/L,硫利达嗪单药即可诱导细胞发生内质网应激。同时硫利达嗪可增加TRAIL对PC9细胞的抑制作用及凋亡诱导作用且可上调PC9细胞表面DR5表达水平,而加入4-PBA可减少硫利达嗪诱导的DR5表达水平上调。流式细胞术结果显示:TRAIL联合硫利达嗪组与单独TRAIL组细胞凋亡率细胞凋亡率分别为(32.6±4.7)%和(3.6±1.3)%,联合组细胞凋亡率较TRAIL单药组相比显著增加(P<0.05),而加入了4-PBA的联合组细胞凋亡率为(17.3±2.9)%,与联合组相比明显下降(P<0.01)。Western blotting结果显示:TRAIL联合硫利达嗪组细胞Cleaved-caspase-8,Cleaved-PARP,DR5表达水平较单独TRAIL组明显上调。硫利达嗪诱导的DR5表达上调及其增加PC9细胞对TRAIL促凋亡效应的敏感性是通过诱导内质网应激发生,并伴随着GRP78及CHOP表达上调发生的,且该效应可被4-苯基丁酸(4-phenylbutyric acid,4-PBA)抑制(P<0.05)。结论硫利达嗪增敏TRAIL对PC9细胞的增殖抑制效应显著,其机制可能与硫利达嗪内质网应激介导的DR5上调有关。