NF-κB与急性胰腺炎关系的临床研究

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目的:观察急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)病人外周血中性粒细胞(polymorphonuclear leukocyte, PMN)内NF-кB活性的变化及其与血清TNF-α、IL-6、8、10之间的关系,探讨NF-кB活化在AP发生、发展中的作用,以及吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对NF-кB的抑制作用。方法:选择19例AP病人为研究对象,在入院48h内根据Ranson评分标准分为轻型急性胰腺炎(mild acute pancreatitis, MAP)组及重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitiis, SAP)组,以16例门诊体检病人为对照组。外周静脉取血各10ml(8mlEDTA抗凝血+2ml非抗凝血),AP病人入院第1天、3天各采血一次;对照组采血一次。分别分离出血浆(限AP病人)、血清及PMN。AP组PMN分别经不同浓度NF-кB抑制剂PDTC(1.0mM和2.0mM两种浓度)体外干预后,提取PMN核蛋白;对照组PMN做体外NF-кB激活抑制试验。应用凝胶迁移率改变分析法(EMSA)测定核蛋白NF-кB的活性,用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法测定血清IL-6、8、10、TNF-α浓度,临床记录病人血常规、血气分析、血生化及血清淀粉酶等检查结果。结果:入院第一天,两组AP病人全血PMN计数较对照组均显著升高(P<0.01), SAP组升高尤甚,较MAP组有统计学差异(P<0.05);AP病人外周血PMN中NF-кB活性较对照组显著增强(P<0.01),且SAP组尤甚,而对照组NF-кB活性很弱,同时入院时AP病人血清IL-6、8、10、TNF-α浓度较对照组均异常升高(P<0.01);IL-6、IL-8、TNF-α同NF-кB活性呈正相关(r= 0.787、0.837、0.825, P均<0.01),IL-10同NF-кB无显著相关性(r=0.468, P>.05);IL-6、8和TNF-α之间呈正相关(IL-6 vs. IL-8,r= 0.924; IL-6 vs. TNF-α,r= 0.636; IL-8 vs. TNF-α,r= 0.718; P均<0.01),同IL-10无显著相关性。入院第三天NF-кB活性及细胞因子水平较入院时降低,但在病程后期出现严重并发症的病人中仍维持较高水平。两种浓度PDTC在体外均可降低AP病人PMN内NF-кB活性(P<0.01),2.0mM PDTC处理组抑制作用更强,与1.0mM PDTC处理组比较统计学差异(P<0.05);SAP病人血浆刺激组PMN内NF-кB活性较对照组增强(P<0.05),PDTC干预+SAP血浆刺激组NF-кB活化程度减弱,同SAP病人血浆刺激组比较有统计学差异(P<0.05)。结论:NF-кB异常活化并通过调控细胞因子参与急性胰腺炎发生发展,外周血中性粒细胞内NF-кB活化状态可作为早期预测急性胰腺炎严重程度的指标;抑制NF-кB活性有助于改善急性胰腺炎预后。
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