【摘 要】
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PTIP（pax transactivation domain-interacting protein）是体内B细胞活化和发育所必需的体液免疫的许可因子,B细胞特异性敲除PTIP基因会引起B细胞亚群的发育障碍并影响体内天然抗体和免疫后特异性抗体的产生。近年来关于B细胞影响机体代谢的研究多聚焦于B细胞在高脂饮食诱导的肥胖及相关代谢性疾病中的重要作用,而在正常饮食条件下,B细胞对机体糖代谢和脂肪稳态的
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PTIP（pax transactivation domain-interacting protein）是体内B细胞活化和发育所必需的体液免疫的许可因子,B细胞特异性敲除PTIP基因会引起B细胞亚群的发育障碍并影响体内天然抗体和免疫后特异性抗体的产生。近年来关于B细胞影响机体代谢的研究多聚焦于B细胞在高脂饮食诱导的肥胖及相关代谢性疾病中的重要作用,而在正常饮食条件下,B细胞对机体糖代谢和脂肪稳态的作用尚不清楚。食品的营养与功能研究也多集中在机体的代谢和免疫调节作用方面。因此,本文通过B细胞特异性敲除PTIP基因的小鼠模型,探讨正常饮食条件下B细胞PTIP基因对小鼠糖代谢和脂肪稳态的影响,以期为不同饮食条件下营养物质的摄入应用于免疫系统与代谢性疾病的研究提供理论基础。论文研究内容如下:（1）为了研究正常饮食条件下,B细胞PTIP基因缺失对机体基础代谢的影响,本文利用全面呼吸监测系统对8周龄野生型小鼠（wild-type,WT）和B细胞特异性敲除PTIP基因小鼠(PTIP-/-)的基础代谢状况进行监测。结果显示正常饮食条件下,PTIP-/-小鼠的呼吸商和葡萄糖氧化量均显著高于WT小鼠,而脂质氧化量显著低于WT小鼠,且雄性和雌性小鼠表现出相同的变化趋势。研究结果表明B细胞PTIP基因缺失会增强机体对葡萄糖的分解代谢能力,且这种变化不受性别影响。（2）为了研究B细胞PTIP基因对机体糖代谢的影响,本文对8周龄WT和PTIP-/-小鼠进行葡萄糖耐受实验、胰岛素敏感性实验以及丙酮酸盐耐受实验,同时记录禁食5 h、14 h和24 h的空腹血糖值。研究结果表明B细胞PTIP基因缺失改变了肝脏糖异生能力和葡萄糖耐受能力但不影响机体对胰岛素的敏感性。（3）本文研究了正常饮食条件下,B细胞PTIP基因对体内脂肪稳态的影响。本文利用micro-CT分析两组8周龄小鼠脂肪分布情况,结果显示PTIP-/-小鼠皮下脂肪堆积量显著低于WT小鼠。本研究对19月龄雌性小鼠进行解剖学观察发现PTIP-/-小鼠皮下腹股沟脂肪堆积量显著低于WT小鼠,这表明B细胞PTIP基因缺失引起的皮下脂肪堆积量的降低可能不受小鼠年龄的影响。本文检测了两组高脂饮食18周的小鼠各类脏器重及占比,结果发现与WT小鼠相比,PTIP-/-小鼠的体重变化及皮下腹股沟脂肪堆积量均无统计学差异。利用非靶向脂质组学方法分析皮下腹股沟脂肪组织中不同种类甘油三酯的含量,结果显示PTIP-/-小鼠皮下脂肪甘油三酯组成被显著改变。利用流式细胞术分析皮下腹股沟脂肪组织中脂肪细胞祖细胞的占比及数量,结果发现两组小鼠皮下脂肪细胞祖细胞数量无统计学差异;另外对皮下脂肪分离得到的基质血管组分（SVF）细胞进行培养及诱导成脂分化,结果显示两组小鼠来源的SVF细胞的增殖和分化能力无差异;以上结果表明B细胞PTIP基因的缺失导致的皮下脂肪堆积量的下降可能与皮下脂肪细胞祖细胞数量以及皮下脂肪分化能力无关。本研究通过给PTIP-/-鼠注射WT小鼠血清,每隔3-4天注射血清一次,连续注射1个月,重塑PTIP-/-小鼠血清IgM和IgG抗体稳态水平。结果显示与PTIP-/-小鼠相比,被注射组小鼠皮下腹股沟脂肪占体重比和重量仅呈增加趋势但无统计学差异。因此,体内IgM和IgG抗体稳态水平与B细胞特异性敲除PTIP基因引起的皮下脂肪堆积量的减少无关。
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