背景南极磷虾（Euphausia superba），又叫大磷虾，其体内富含虾青素。虾青素是一种极强的天然抗氧化剂，具有抵抗心血管老化、防辐射、预防癌症以及老年痴呆和保护眼睛及皮肤等良好功效，有着非常高的研究价值。虾青素存在形式主要为：虾青素一酯、虾青素二酯和游离的虾青素，其中主要形式是稳定的酯化虾青素，即虾青素一酯和虾青素二酯。虾青素一酯和虾青素二酯没有标准品，国内对南极磷虾中虾青素酯进一步分离纯化以及南极磷虾中虾青素立体异构体的研究并不成熟，故亟待对其进行研究和开发。目的本文旨在建立对从南极磷虾中提取出来的虾青素、虾青素一酯和虾青素二酯进行进一步分离纯化以及立体异构体鉴定的方法，再通过气相-质谱联用（GC-MS）、高效液相色谱（HPLC）等方法确定其组成及立体异构体。方法本文以南极磷虾中虾青素及其酯作为研究对象。利用AgNO3高效薄层板刮板分离方法分别确定了虾青素一酯和二酯的最佳进一步分离纯化条件，将进一步分离纯化之后的虾青素一酯和虾青素二酯进行甲酯化，再进行GC-MS检测，分别分析其每条色谱带的脂肪酸结构。利用HPLC方法进行了虾青素、皂化后的虾青素一酯和皂化后的虾青素二酯的立体异构体检测分析。结果1.本研究通过对AgNO3甲醇溶液浓度，高效薄层H板浸泡时间，高效薄层H板烘干温度，高效薄层H板烘干时间以及展开剂配比等的单因素实验，确定了利用AgNO3高效薄层H板刮板分离虾青素一酯和二酯的最佳条件，即当AgNO3甲醇溶液浓度为2%，高效薄层H板浸泡时间为15min，烘干温度为60℃，烘干时间为1h，采用展开剂为石油醚:三乙胺:丙酮=9.5ml:10μl:3ml时，虾青素一酯分离效果最好，分出两条色谱带。当采用展开剂为正己烷:丙酮=3:1时，二酯分离效果最好，分出五条色谱带。2.用GC-MS方法对经AgNO3高效薄层H板刮板分离的虾青素一酯的两条色谱带和虾青素二酯的五条色谱带进行了检测及分析：虾青素一酯第一条色谱带富含6.9%的虾青素十三烯酸一酯和48.83%的虾青素十五酸一酯；第二条色谱带富含100%的偶数脂肪酸虾青素一酯。虾青素二酯第一条色谱带富含62.03%饱和虾青素二酯；第二条色谱带富含73.34%饱和虾青素二酯；第三条色谱带富含82.26%不饱和虾青素二酯；第四条色谱带富含54.58%不饱和虾青素二酯；第五条色谱带富含75.61%不饱和虾青素二酯。3.对虾青素标准品，虾青素一酯经皂化后得到的虾青素以及虾青素二酯经皂化后得到的虾青素分别用HPLC方法进行立体异构体分析检测：虾青素标准品在18.765min、19.938min和21.197min三个时间点出现（3S,3’S），（3S,3’R），(3R,3’R)三种立体异构体；虾青素一酯制备出的虾青素只在29.971min一个时间点出现一个峰，对比标准品可以得出，虾青素一酯中的虾青素只有（3R,3’R）一种立体异构体；虾青素二酯制备出的虾青素在18.422min、20.189min和21.281min三个时间点出现三个峰，对比标准品可以得出，虾青素二酯中的虾青素存在虾青素标准品的三种立体结构。结论与创新国内外首次对南极磷虾中的虾青素一酯和虾青素二酯进行AgNO3高效薄层H板刮板再分离并得到具有一定规律的实验结果：首次分离出富含十三烯酸一酯和十五酸一酯的奇数脂肪酸虾青素一酯，有利于推进对虾青素奇数脂肪酸一酯的再分离、进一步纯化和生理活性差异的研究。虾青素二酯的分离结果也极具规律性，制备出了富含饱和脂肪酸的虾青素二酯和富含不饱和脂肪酸的虾青素二酯，提供了一种再分离虾青素二酯的检测方法。此外，虾青素一酯也首次被检测出只含有一种异构体，同时制备出了只含有一种立体异构体体的虾青素，这就又进一步推进了南极磷虾虾油的鉴定工作。