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银杏叶提取物(EGB761)已广泛用于临床。本论文针对其活性物质银杏酸、内酯、双黄酮等的色谱分析方法展开研究,主要工作及研究成果如下:(1)针对银杏酸的药典检测方法灵敏度低、基体干扰明显,建立了分散液相微萃取-高效液相色谱检测银杏提取物中银杏酸的方法。通过分散液相微萃取可将待测试样中的低浓度银杏酸快速有效的富集于有机相中,同时使共存的强极性物质进入水相,从而减小了基体干扰。研究结果表明,以200μL氯仿作为萃取剂,将1.00 mL试样溶液与200μL氯仿混合后分散到10.0 mL水中,30 s内即可达到萃取平衡,银杏酸可富集7倍以上,而基体杂质的浓度显著小于萃取前。改进的色谱分析条件为:C-18色谱柱、以含0.01 mol/L三氟乙酸的甲醇-水(92:8)溶液等度洗脱、柱温40°C进行银杏酸分离,240 nm波长检测具有最高的信噪比。经方法学验证,本方法在0.1~5 mg/L浓度范围内有很好的线性关系,检出限0.51~1.08 mg/kg,重现性5.6%~8.8%,加标回收率90%~103%。与欧盟药典EP8.0方法进行对照实验,所得结果具有一致性,且精度更高。(2)针对药典方法检测银杏内酯,使用四氢呋喃-水-正丙醇流动相易生成过氧化物的问题,提出甲醇-水体系作为流动相的方法。结果表明,从20%甲醇水溶液到60%甲醇水溶液进行梯度洗脱,可有效分离试样中的五种内酯成分和基体杂质,且柱效优于四氢呋喃-水-正丙醇流动相体系,系统适应性更好。经方法学验证,本方法在50~3000 mg/L浓度范围内具有很好的线性关系,方法检出限达到0.507~1.003 g/kg,可很好的满足药典检测要求,重现性在2.1%~9.8%之间,加标回收率在96%~106%之间。与中国药典2015版方法进行对照实验,所得结果具有一致性。(3)针对银杏双黄酮的研究过程中缺乏相应标准样品的问题,对银杏叶粗提物中的双黄酮进行分离、富集,并通过制备色谱分离,色谱条件为:C-18色谱柱、以含0.01 mol/L乙酸的甲醇-水溶液梯度洗脱,检测波长330 nm。得到三种双黄酮组分。经红外光谱、紫外光谱、氢核磁共振、高分辨质谱鉴定,该三种组分对应的双黄酮分别是白果素、银杏黄素(异构体混合物)和金松双黄酮,分子量分别为552、566和580,试样纯度分别为90.5%、95.7%、93.9%。