论文部分内容阅读
目的：研究人膀胱癌5637细胞系CD133阳性细胞中的分离方法以及CD133细胞的体外增殖、分化、自我更新及迁徙能力，初步探讨膀胱癌中CD133阳性细胞亚群的干细胞特性。方法：流式细胞仪检测膀胱癌5637细胞中CD133阳性细胞表达情况；免疫磁珠分选技术纯化CD133阳性肿瘤细胞，流式细胞仪检测免疫磁珠发分选的纯度；MTT法检测CD133阳性细胞体外增殖能力；平板实验检测其克隆能力；划痕实验检测其体外迁徙能力，流式细胞仪检测其分化能力。结果：1、流式细胞仪检测CD133阳性细胞在膀胱癌5637细胞中比例为1.45%。2、经免疫磁珠法分离、流式细胞仪检测，CD133~+细胞纯度高达93.42%。3、MTT实验、平板实验、划痕实验结果显示CD133~+细胞增殖克隆能力及迁徙能力较CD133~-细胞有明显差异。4、分化潜能测定：CD133~+细胞体外培养1周，分别在第2、4、6天利用流式细胞仪检测CD133~+细胞的比例，培养至第2天，CD133~+细胞的比例由原来的98%迅速下降至48.19%；培养至第4天，CD133~+细胞与对照组无明显差别。结论：1、膀胱癌5637细胞系中存在CD133阳性细胞亚群；2、利用免疫磁珠分选技术可以成功地获得CD133阳性细胞，经流式细胞仪鉴定阳性细胞分选的纯度达到93.45%，为进一步研究CD133细胞的生物学功能奠定了基础；3、CD133~+细胞与CD133~-细胞的体外生物学功能存在明显差异，CD133~+细胞具有自我更新、迁徙、生成其他表型肿瘤细胞等干细胞样特性，提示CD133可能与膀胱癌细胞的复发及迁移有关。