分米波防治肌腱粘连及促周围神经再生机制的实验研究

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肌腱、周围神经损伤是手外科常见、多发损伤,肌腱修复术后常因肌腱粘连影响临床疗效。虽然近年来许多学者在探讨改善肌腱血供、肌腱愈合机制、修复和重建腱鞘、术后早期被动活动及物理治疗等方面进行了大量的研究,取得了一定成果,但迄今为止尚无一种完全有效且简便易行的防治肌腱粘连的方法。显微外科技术的飞速发展,使周围神经损伤修复日趋完美,精湛的显微外科修复技术能精确地吻接损伤之神经,为神经再生提供了良好的基础。但损伤神经的功能恢复仍不理想。近年来国、内外已发现许多理化因素、生物制品及相关药物等具有一定程度的促进神经修复与再生作用。但由于周围神经修复与再生过程中,不仅需要受损神经元存活、轴突生长,而且还需要朝正确方向、沿合适路线延伸,营养和导向缺一不可,既有赖于一个适宜的综合微环境。 近年来康复医学的飞速发展,应用物理因子防治疾病的报道越来越多。分米波是—种高频电磁波(属于电疗范畴),由于其具有良好的改善局部血液循环、促进代谢、减轻局部炎性反应、减轻疼痛等治疗作用而受到许多学者和临床医师的广泛关注。田德虎等于临床中对屈肌腱损伤术后和糖尿病周围神经病变患者行局部分米波辅射,结果发现屈肌腱损伤术后患者术后治疗3个月,TAM法测定,优良率达97%,推测其机制为分米波能有效地促进肌腱内愈合,减少外愈合,从而减轻粘连,镇痛作用可减轻患者早期功能锻炼时的疼痛利于早期功能锻炼;糖尿病周围神经病变患者,分米波治疗1个月,总有效率达83%,推测由于分米波增加血循环,改善神经缺血、缺氧,抑制炎症反应,减轻神经周围粘连、卡压,进一步改善神经缺血、缺氧,为神经再生提供良好的微循环,利于神经的修复与再生。基于此本课题采用Leghorn鸡趾屈肌腱损伤修复模型和SD大鼠坐骨神经再生室模型,局部分米波辅射,通过对肌腱、神经及周围组织大体观察、光镜观察、电镜观察,肌腱的生物力学检测、神经电生理检测、免疫组化观察、RT-PCR等方法,分析、揭示分米波对肌腱愈合、防治肌腱粘连的机制;促周围神经再生的组织学及分子机制。为临床应用提供理论<WP=5>依据。本实验具体分三部分。1分米波防治肌腱粘连机制的实验研究 本实验选用Leghorn鸡趾深屈肌肌腱损伤修复模型,局部应用分米波治疗,通过组织学观察和生物力学检测,探讨、揭示分米波对肌腱愈合、防治肌腱粘连的机制,为临床应用提供理论依据。选用4月龄Leghorn鸡70只,随机分为A组(术后分米波治疗组)和B组(空白对照组),每组35只。两组动物均用双足III、Ⅳ趾建立趾深屈肌腱损伤修复模型。A组于术后第1天至术后3周俯卧、双腿后伸体位固定于试验台,跖侧局部分米波辐射,B组同时进行理疗空白对照。分别于术后1、2、3、4、6周对肌腱、腱周和腱鞘进行大体观察,并切取肌腱吻合口为中心的长约1cm的包裹腱鞘的趾深屈肌腱,进行HE和Masson染色,显微镜下观察。术后2、4周取肌腱吻合部位组织,进行透射电镜检查,术后3、6周分别进行肌腱的大体和组织学粘连分级、愈合分级、炎性反应分级,并进行分级计数。术后3、6周应用生物力学实验机进行肌腱滑动距离、康复顺应性和肌腱抗张力强度测定。将所得数据行统计学分析。实验结果如下:1.1大体和组织学观察:术后1、2、3、4和6周大体和组织学观察显示,A组较B组早期肌腱及腱周组织水肿和炎性反应轻,炎性细胞浸润范围小。术后3周A组腱周粘连疏松,B组腱周广泛致密粘连。A组较B组愈合质量好;两组肌腱的炎性反应评分比较,术后3周A组肌腱及腱周组织的炎性浸润范围小于B组(P<0.05);两组肌腱粘连大体分级比较,术后3周、6周A组肌腱的粘连程度均低于B组(P<0.05);两组肌腱粘连组织学分级比较,术后3周肌腱粘连程度两组无统计学差异(P>0.05),术后6周A组肌腱的粘连程度低于B组 (P<0.05);肌腱愈合组织学分级比较,术后6周A组肌腱愈合优良率高于B组(P<0.05)。1.2透视电镜观察: A组成纤维细胞合成代谢较B组更旺盛,胶原原纤维产生较多。1.3生物力学检测:术后3周、6周A组肌腱的滑动距离均大于B组(P<0.05);术后3周A组肌腱的康复顺应性大于B组(P<0.05),术后6周两组肌腱康复顺应性差异无显著性(P>.05);术后3周、6周A组肌腱抗张力强度均大于B组(P<0.01)。2分米波促周围神经再生机制的实验研究 <WP=6> 本实验建立SD大鼠坐骨神经再生室模型,局部行分米波辐射。通过大体、光镜、免疫组织化学、电镜观察、轴突图像分析、电生理检测及坐骨神经功能指数等方法的运用,探讨、揭示分米波对周围神经损伤后神经修复与再生过程的作用机制,以期指导临床。取体重200~250g SD健康大鼠120只,随机分成A(分米波治疗组)、B(空白对照组)两组,每组60只。分别于右侧大腿制备坐骨神经再生室模型。A组于术后第1天至取材,俯卧、双腿后伸体位固定于试验台,局部分米波辐射,B组于A组治疗同时行理疗空白对照。分别于术后1、2、4、8和12周进行大体观察;并于吻合口近、远端2mm处及再生神经中段取2mm长神经段,HE染色,光镜下观察:分别于术后2、4和8周取标本,透射电镜观察;术后12周取神经远段作轴突图像分析;术后3天、1、2、4和8周取材
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