几丁质/壳聚糖酶产生菌的分离及发酵条件、酶学性质研究

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本实验室从浙江省滩涂淤泥筛选了一株既产几丁质酶又产壳聚糖酶的菌株CJ-5,经鉴定属于气单胞菌属(Aeromonas)。通过对Aeromonas sp. cJ-5发酵条件的研究,确定其最佳产几丁质酶的条件为:培养温度30℃,pH7,几丁质底物浓度2.5%,500mL摇瓶的培养基装量为100mL;最佳产壳聚糖酶的条件为:培养温度30℃,pH6,壳聚糖底物浓度2.5%,摇瓶装量为125mL。在3升发酵罐中以几丁质为底物进行发酵,几丁质酶活力可达0.41U/mL,壳聚糖酶活为1.5U/mL。通过对硫酸铵沉淀获得的粗酶进行酶学性质研究,发现该菌产生的几丁质酶与壳聚糖酶的最适反应温度为36℃与56℃,其最适反应pH都为7.0。两种酶在50℃以上的温度条件下容易失活。通过非变性电泳和SDS-PAGE的分析,确定了该菌产生的几丁质酶的分子量为250kD,壳聚糖酶的分子量为50kD。通过以几丁质为底物的发酵液试验表明,发酵液具有明显的抑制真菌以及促进水稻生长的作用。
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