Hofmeister序列阴离子对蛋白纤维化的影响

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自19世纪80年代末,捷克科学家Hofmeister发现了一个与蛋白变性有关的序列,即Hofmeister序列,之后与之相关的研究就从未中断过。近年来,更是有许多生物学家和化学家将对Hofmeister序列研究的着眼点转移到其对蛋白聚集的影响上。本文主要通过ThT荧光光谱法和原子力显微镜这两种实验手段,系统地研究并分析了在不同浓度、pH条件下Hofmeister序列阴离子对溶菌酶蛋白纤维化聚集过程以及纤维化聚集体最终形貌的影响。通过筛选与比较,选择Hofmeister阴离子序列中具有代表性的六种阴离子进行研究,选择溶菌酶作为本研究的模型蛋白。通过密集采集在不同条件下Hofmeister序列阴离子加入到溶菌酶体系中的ThT荧光值获得纤维化动力学曲线,利用公式拟合得到动力学参数并进行深入分析在不同条件下加入Hofmeister序列阴离子对溶菌酶蛋白纤维化动力学参数的影响。在溶菌酶纤维化结束后,使用原子力显微镜对Hofmeister序列阴离子影响下的溶菌酶纤维化聚集体的最终形貌进行微观的呈现,对比不同Hofmeister序列阴离子对纤维化形貌的差异影响。通过ThT荧光动力学研究发现:(1)Hofmeister序列中六种阴离子在促进溶菌酶蛋白纤维化的影响上并不与其在序列中的顺序一致,而是呈现一种与Hofmeister序列无关的顺序;(2)在不同浓度条件下,同一Hofmeister序列阴离子对蛋白纤维化的影响行为类似,不同Hofmeister阴离子对蛋白纤维化的影响与(1)中所述一致,呈现与Hofmeister序列无关的顺序;(3)在不同pH条件下,Hofmeister序列阴离子对溶菌酶蛋白纤维化的影响的差异集中于延迟区部分,当pH值增大时,Hofmeister序列阴离子加入到溶菌酶体系中后,动力学参数显示延迟区缩短,但其它规律和前述两种条件下的观察一致。在观察原子力显微镜下所呈现的溶菌酶纤维化聚集体的形貌发现:(1)不同的Hofmeister序列阴离子对溶菌酶蛋白纤维化的最终形貌影响存在差异;(2)不同浓度条件下,同一阴离子加入到溶菌酶中,其蛋白纤维化的最终形貌无明显差异;(3)Hofmeister序列阴离子对溶菌酶蛋白纤维化聚集体的最终形貌影响与pH无关,而是与加入的阴离子有关。
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