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目的:通过体外细胞实验,研究不同浓度的双硫仑（Disulfiram,DSF）及双硫仑联合铜离子（DSF/Cu）对人宫颈癌Hela细胞增殖的影响,并探讨其与NF-κB及PI3K/Akt/mTOR蛋白通路的关系。方法:1、以人宫颈癌Hela细胞株为研究对象,将Cu（1μmol/L）、不同浓度的DSF（0.1μmol/L、0.2μmol/L、0.4μmol/L、0.8μmol/L、1.6μmol/L、3.2μmol/L、6.4μmol/L）以及DSF/Cu（浓度为0.1μmol/L、0.2μmol/L、0.4μmol/L、0.8μmol/L、1.6μmol/L、3.2μmol/L、6.4μmol/L的DSF联合1μmol/L的Cu）分别作用于人宫颈癌Hela细胞24h,每个浓度梯度均设5个复孔,通过噻唑蓝比色法（MTT法）检测各组对Hela细胞的增殖抑制作用,并用graph prims5软件计算相应的IC50值;2、蛋白质印迹法（Western blot,WB）检测Cu、DSF、DSF/Cu分别处理细胞后各组细胞内p65、PI3K、Akt、p-Akt及mTOR蛋白表达的情况;3、使用SPSS19.0统计软件进行统计分析,各组实验数据用均数±标准差（x±s）来表示,两独立样本均数的比较采用t检验,并且通过单向ANOVA进行多个样品平均值的比较。均以α=0.05为检验标准。结果:MTT法检测结果显示Cu（1μmol/L）组的增殖抑制率为（1.00±0.6）%,与对照组相比较差异无统计学意义（P>0.05）。浓度为0.1μmol/L、0.2μmol/L、0.4μmol/L、0.8μmol/L、1.6μmol/L、3.2μmol/L、6.4μmol/L的DSF作用24h的细胞增殖抑制率分别是12.08%、12.87%、13.11%、14.74%、15.66%、16.47%、18.98%,与对照组比较均有统计学意义（P<0.0001）且有浓度依赖性（F=2.692,P<0.05）。当不同浓度的DSF联合铜离子（1μmol/L）时作用于人宫颈癌Hela细胞24h的细胞增殖抑制率显著增加,分别为30.13%、60.23%、71.65%、87.75%、91.23%、94.88%、97.66%。与对照组相比较差异均有统计学意义（P<0.0001）,且随着浓度的增加,抑制作用增强（F=215.7,P<0.0001）。DSF/Cu对Hela细胞的增殖抑制作用较单用DSF更加明显,作用24h两组IC50值分别为（2.460±0.008）μmol/L和（0.053±0.010）μmol/L。蛋白印迹法显示DSF及DSF/Cu作用Hela细胞后p65及p-Akt蛋白的表达水平下降（P<0.05）,而对PI3K、Akt、mTOR蛋白的表达无明显影响（P>0.05）,其中DSF/Cu处理组细胞的p65及p-Akt蛋白较DSF组下降水平更为显著。结论:1、DSF/Cu及DSF对Hela细胞均有抑制增殖的作用,其中DSF联合Cu的作用显著强于单独使用DSF。2、其机制可能与抑制NF-κB及PI3K/Akt/mTOR蛋白通路有关。