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本研究在优化花椰菜再生体系的基础上,构建了农杆菌介导的遗传转化体系。应用该遗传转化体系,将白菜的BpERF1(ethylene responsive factor)基因和辣椒的CaNAC1(NAM,ATAF and CUC2)基因进行了花椰菜雪白、松花的遗传转化,获得转基因植株,并研究了外源基因表达对转基因植株抗病性的影响,试验的主要研究结果如下:1、建立了花椰菜离体再生体系试验对影响花椰菜再生的基因型、苗龄、激素、AgNO3等因素进行了研究,结果表明:不同基因型的离体再生差异显著,雪白、松花在最适培养条件下再生率为95%左右,而台宝仅为65%左右;培养6d的无菌苗下胚轴分化能力最佳;细胞分裂素类与生长素类植物生长调节剂不同浓度配合使用对外植体再生频率影响显著,其中在MS中添加3.0mg/L6-BA和0.2mg/LIAA时,雪白下胚轴的分化率达到95.7%,平均出芽数为3.9个,并且能很好地减小玻璃化程度;AgNO3对再生有很好的促进作用,随着浓度的增加效果更明显,当达到4.0mg/L时雪白的转化率达97%,但当达到6mg/L时分化率有所下降。2、建立了花椰菜遗传转化体系选择潮霉素浓度5mg/L为临界筛选浓度;羧苄青霉素初始抑菌浓度为500mg/L,并在继代培养时逐渐降低至200mg/L,并且再生频率和抑菌效果非常理想;此外,还研究了卡那霉素筛选体系,确定最适宜的卡那霉素浓度为10mg/L。最终确定了最优的农杆菌介导的花椰菜转化体系为:预培养2d、菌液浓度OD600为0.4-0.6,3-5min侵染,3d共培养,延迟14d的筛选培养方式。3、花椰菜转化大白菜BpERF1基因的抗性再生植株的获得及其分子检测和抗病性鉴定利用本研究所构建的花椰菜农杆菌介导的转基因体系,对克隆在pMDC32载体上的外源大白菜BpERF1基因进行了花椰菜遗传转化,获得了10株潮霉素抗性再生植株。PCR检测6株呈阳性,表明大白菜BpERF1基因已整合进这些植株的因组DNA中。初步的草酸侵染离体叶片模拟菌核病抗病性鉴定结果表明,转基因植株发病时间较长,且叶片发病程度及霉菌菌斑生长数量较未转化植株显著减轻。此外,对NPTⅡ基因进行特异性引物PCR扩增检测,亦得到特异性条带和阳性对照一致,表明CaNAC1基因已经整合到了花椰菜转化植株DNA内。