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目的：利用含不同浓度的TNF-α的条件培养液对兔视网膜Müller细胞进行体外培养，观察兔视网膜Müller细胞的生长变化情况，利用激光共聚焦显微镜结合荧光免疫细胞化学染色法，对在不同浓度TNF-α的作用下兔视网膜Müller细胞的GLAST进行定位、半定量分析，观察Müller细胞GLAST的变化情况，深入探讨发生在不同浓度TNF-α时，Müller细胞对调节视网膜谷氨酸浓度作用的影响。方法：使用酶消化法培养兔视网膜Müller细胞；通过相差显微镜、HE染色、荧光免疫技术、电镜观察其形态特征及特殊的免疫标记物进行细胞身份鉴定和纯度的评估。分别在培养液TNF-α浓度为0pg/ml、20pg/ml、50pg/ml、100pg/ml、200pg/ml培养条件下培养48h后，通过MTT法测定Müller细胞的生长活性的变化；采用荧光免疫技术，对Müller细胞胞膜上的GLAST进行荧光标记，通过图像分析软件测定平均光密度值观察Müller细胞的GLAST表达的变化。统计学分析：采用SPSS11.0统计软件进行分析，所有数据以均数±标准差表示，采用单因素方差分析，p<0.05有统计学意义。结果：（一）、通过使用酶消化法培养Müller细胞，培养3d后，培养瓶可见散在生长的圆形细胞，第9-10dMüller细胞形态基本稳定，约15d后，可见细胞开始融合；电镜下可见Müller细胞胞浆内含有丰富8~10nm微丝的特异性超微结构；荧光免疫标记见兔视网膜Müller细胞CRALBP、GS呈绿色和红色荧光标记，二者阳性率均95%以上；（二）、随着培养液中TNF-α浓度的升高，光镜下可见细胞折光增加，部分细胞突起出现回缩现象，漂浮的失活细胞逐渐增多，下方贴壁细胞部分出现溶解现象。MTT法测细胞活力，各TNF-α干预组测得的OD值与正常组比较均有显著性意义（p<0.05），并且随TNF-α浓度升高OD值呈逐渐下降趋势。（三）、正常组内Müller细胞的胞浆、突起及胞膜呈绿色荧光，胞膜及突起上可见颗粒状高荧光分布。各TNF-α干预组与正常组比较Müller细胞上的GLAST表达均有显著减少（p<0.05），随TNF-α浓度升高GLAST表达逐渐减少。结论：（一）、使用酶消化法培养兔视网膜Müller细胞，不仅纯度比较高而且周期比较短，可以用于实验研究；（二）、TNF-α可明显抑制Müller细胞生长活性，诱导细胞凋亡，并与TNF-α的浓度密切相关，随着浓度的增加抑制作用越强。（三）、GLAST在兔视网膜Müller细胞上广泛表达，主要存在与细胞膜和突起上。TNF-α可抑制Müller细胞上GLAST的活性，随着浓度的增加抑制作用越强，减弱其对视网膜神经节细胞的保护作用。