灰葡萄孢拮抗细菌种类鉴定、生长条件及在番茄体表定殖的研究

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对灰葡萄孢等病菌拮抗能力强、防病效果好的3株细菌,经形态、培养性状观察和生理生化测定,鉴定为2属2种,即W10为地衣芽孢杆菌[Bacillus licheniformis(weigmann)Chester];W3和Y2-11-1为多粘类芽孢杆菌[Paenibacillus polymyxa(Prazmowski)Ash et al]。这两种对蔬菜灰霉病的高效拮抗细菌为国内首次报道和应用。 3株拮抗细菌的生长条件研究表明,通常菌量达到最大时的培养时间为24~72h;生长温度为27~30℃;培养液pH值为7~8。 根据试验结果及经济因素,拮抗细菌的最佳营养发酵配方是:W10菌株为1%麦芽糖,4%黄豆饼粉,0.2%硝酸钠,0.02%磷酸氢二钾和0.05%酵母膏:W3菌株为2%蔗糖,4%黄豆饼粉,0.4%酵母膏;Y2-11-1菌株为1%麦芽糖,2%黄豆饼粉,0.2%硝酸钠,0.02%磷酸氢二钾以及0.2%酵母膏。 3株拮抗细菌通过抗药性诱导,获得抗利福平350μg/ml的标记菌株,并用于检测在番茄植株体表的定殖能力。拮抗细菌在番茄植物体表的定殖与定殖部位、引进浓度、接种灰霉病菌时间和环境因子有关。在番茄叶表拮抗细菌处理后10~15d仍可检测到一定的菌量。拮抗细菌在番茄果表的定殖能力与最初引进的细菌浓度呈正相关,即引进的浓度越高,定殖时间越长,定殖的菌量也越大。除W10菌株外,在高浓度(10~9cfu/ml)下,拮抗细菌处理后10~15d也能检测到少量细菌。 与对照相比,接种灰霉病菌对拮抗细菌的定殖有一定的影响。但是,先接种拮抗细菌后接种灰霉病菌(间隔1d)要比拮抗细菌与灰霉病菌同时接种、先接种灰霉病菌后接种拮抗细菌影响小。这表明灰霉病菌与拮抗细菌间存在营养、空间的竞争,也显示拮抗细菌在灰霉病害发生前使用要比发生后使用效果好。 温度、湿度、光照等环境因子对拮抗细菌的定殖均有影响。拮抗细菌定殖的最佳条件一般为:高湿(RH 95~100%)、光照12h和温度25~35℃。在一定的温度扬州大学硕士学位论文范围内(15一35℃),温度愈高,越有利于拮抗细菌的生长和定殖。光照对拮抗细菌的定殖也影响很大,黑暗或持续光照24h条件下,拮抗细菌的定殖要比光照12h差。一般来说,拮抗细菌的生长和定殖需要高湿(RH 95一10俄)条件,湿度越高,定殖越好。
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